土壤灭菌方法(6篇)

时间:2024-07-30

土壤灭菌方法篇1

土壤既是植物生长的重要基础,也是病虫害的藏身之地。在城市园林建设过程中,一定要注重土壤的病虫害处理。有些植物的病原物能够在土壤中冬眠存活,甚至存活好多年,比如,有些菌核、厚垣孢子能够在土壤中存活多年。对于很多的土壤病虫害他们的生存能力非常强,可以在寄主的残留体上生存,也能够在土壤中生活。城市园林在进行土壤培育过程中,会使用肥料,这些肥料也会成为一些病虫害的源头。各种虫害也会以不同的方式在树基周围的土壤中生存。因此,在城市园林建设绿化和管理过程中,尤其是在种植苗木之前,一定要做好土壤的卫生处理,首先对土壤进行化学处理,运用辛硫磷、五氯硝基苯等对土壤进行虫害处理。还可以对土壤进行冷冻处理,能够让土壤中的越冬害虫在天气极其寒冷的情况下受冻致死,并且能够改善较好的细菌以及厌氧性细菌的生存环境,能够防治土壤中的各种病虫害,同时能够降低土壤的含菌量。翻耕时应该以20~30cm的深度为好,如果要使用农家肥一定要对农家肥进行腐熟,防止各种病虫害趁机侵入土壤。

2做好日常园林病虫害的监测工作

平时的检测工作对于园林病虫害的防治至关重要,一方面是因为有些病毒在此前的检验检疫中没有被发现或者出现了漏检,随着这些植物的生长,很多的漏检或者没有发现的病虫害,逐渐繁殖发病。另外,一些新近移栽树木很可能会成为当地一些常见病虫害的最好寄主,由于这些新来的苗木缺乏相应的免疫力或者没有很好的抵抗能力,就为当地的病虫害提供了一个非常适宜的生存发展环境,当地的病虫害对于这些新来植物的危害性非常大。因此,在平时一定要做好日常的检测工作,能够及时的发现各种疫情,并且以最快的方式采取有效措施,防止疫情蔓延,把各种疫情控制在萌芽状态,从而确保城市园林植物保护能够持久高效。在日常检验检测中要针对不同的病虫害采取不同的检测方法,对于各种细菌病毒、线虫要做好到现场观测,及时切取相应的病变植株,进行分离和鉴定。对于一些虫害要采取一定的捕杀工具,或者诱捕的药剂,进行捕捉观测,并且及时处理。

3做好综合防治工作

3.1做好养护预防工作在城市园林的植物保护方面要做到适时适量合理的给植物进行施肥浇水,对植物进行除草中耕,同时在不同的季节对植物进行整形修剪,确保植株内能够通风透气。这样不仅能够保证植物的生长更加优美,让植物发挥美化亮化功能,让植物生长的更加健壮,同时也能够让植物达到一个最佳的生长状态,避免各种不良环境的影响,尤其是能够提高抗病毒和抵抗各种虫害的能力,从而有效地降低各种虫害对植物园林的腐蚀和影响。

3.2做好物理防治工作利用物理的方法来去除各种病虫害,结合各种病虫害的生长周期,采取捕杀诱杀的方式消灭各种害虫,同时利用各种害虫的各种趋向性和习性,配置一定的杀虫剂进行诱杀,提高灭虫效率。

3.3配合生物防治综合利用各种生物以及生物的代谢物来有效控制害虫的种群和数量,从而达到有效控制和消灭害虫的防护目标。一般采取以虫治虫、以菌治虫的方式。在城市园林的管理过程中,一旦天敌能够在庭园林中建立自己稳定的族群,就能够对各种病虫害产生持续的防治工作。这种方式不但不会影响城市的环境,不会造成环境污染,对人以及各种其他有益食物的危害非常小,同时能够很好地消灭害虫,保持生态平衡。

土壤灭菌方法篇2

忠实的“厨师”

我们所积的有机肥料,如果不经过植物的“厨师”——土壤微生物的加工,植物是很难吸收的。微生物能够把土壤里的动植物遗体和有机肥料腐烂成为腐植质,给土壤造成巨大数量的有机质和矿物质的化合物,它是庄稼最好的养料。

氮是庄稼不可缺少的养料。大气中虽然有大量的氮,但这种分子态的氮,植物是无法受用的,而固氮菌、根瘤菌却能把空气中的氮素做成氮化合物,供作物吸收。由于固氮菌的辛勤劳动,每亩地每年大约能固定住五斤左右的氮素,供庄稼食用;豆科植物靠着根瘤菌的帮忙,每亩地每年大约能留住十二斤氮。还有一种硝化细菌,他能把有机物分解时产生的氮(就是平常说的阿摩尼亚)抓住,并把它变为硝酸盐类,这是庄稼最好吃的氮化物。磷细菌能够把土壤中的“死”磷变为“活”磷,送到庄稼的餐桌上。硅酸盐细菌则能把土壤及岩石中的钾释放出来,然后再把它“烹饪”咸庄稼可口的钾素养料。

人们发现微生物对庄稼有这样大的作用,就将它做成细菌肥料和种子一同播入地下,等于为庄稼聘下了忠实的“厨师”。

庄稼的“药剂师”

肉眼看不见的微生物世界,也存在着互相依存互相制约的关系。有些微生物能和睦共处,各不相扰。有的还能互助互利。但也有不少微生物,彼此视同仇敌,你打我,我打它。科学家发现霉菌、放线菌、真菌等能分泌出抗菌物质,把敌对微生物致于死命。现在用人工方法提制出来的“抗菌素”,如青霉素、链霉素、金霉素等,它们曾挽救过很多人的生命。人们亲喏地称这些微生物为“药剂师”。

在农业上也有不少种抗菌素,像链霉素、放线菌酮,P—9号等,可以通过作物吸收运到庄稼的各个组织中去,病菌胆敢进犯就会被斩杀。例如试验用万分之一至十万分之一的链霉素溶液浸黄瓜种子,可以被种子吸人体内,能保黄瓜一生不受锈叶病菌的侵害。试用抗菌素P—9号抗小麦锈病,它被小麦吸收后,能增强小麦的抗锈力,使小麦在很长时间内能抗锈菌的侵袭。

还有的抗菌素,不仅能替庄稼治病,还能刺激庄稼生长。譬如用5406号做试验,除能抑制真菌、细菌的繁殖外,还能分泌出刺激性物质,有促进细胞生长和分裂,刺激植物发根等神通。实验证明:它能刺激小麦增产百分之二十,棉花增产百分之十六,白菜增产百分之三十。

用抗菌素来防治植物病害只是初露锋芒,但已表现出令人可喜的效果。所以植物保护学家竞相研究,为庄稼寻找更好的“药剂师”。

以菌灭虫

许多害虫和其他动物一样,也常常受到微生物的侵袭而染病死亡。于是,敏感的生物学家,便想利用微生物,对害虫进行一场“细菌战”。

五十多年前,德国病理学家贝尔林奈发现苏云金杆菌能使地中海粉螟幼虫染病死亡。经过试验,这种细菌对玉米螟、毒蛾、红铃虫、菜青虫、许多种森林害虫都有良好的杀灭效果。现在它已被制成苏云金杆菌制剂,用到除虫战线上。只要把这种制剂喷撒在庄稼的茎叶上,让害虫吃到肚子里,这种细菌就在害虫肚子里生儿育女,分泌毒素,使害虫得“厌食症”,不食不动,并且拉稀,最后痿缩而死。

土壤灭菌方法篇3

关键词:恩益碧;设施韭菜;根围土壤微生物多样性;生长;产量

中图分类号:S633.3文献标识码:A文章编号:1001-3547(2013)16-0064-05

恩益碧(NutrientEnhancingBalancer,NEB)是美国根茂公司研制生产的新型有机生物高科技产品,其原理主要是使丛枝泡囊菌与植物根系形成共生关系,即形成丛枝泡囊菌根,该菌根一旦侵染作物根系,能以不同方式影响植物的代谢过程,促进根际有益微生物群落大量繁殖,分泌抗生素,吸收有害菌的营养,抑制有害菌的生长,促进作物形成庞大的根系,高效吸收作物原来无法利用的养分和水分,从而促进作物生长[1]。因此,恩益碧(NEB)具有“三多”(多生根、多开花、多结果)、“六抗”(抗重茬、抗病害、抗虫害、抗旱、抗寒、抗早衰)、耐涝、早熟、解磷、解钾等多种功能,是解决重茬病害的理想产品之一。目前,恩益碧(NEB)已在水稻、玉米、马铃薯、葡萄、加工番茄、豆类、甜菜等作物上得到广泛应用,具有显著的增产增收效果,在防治西瓜枯萎病、大豆和桃树根腐病以及马铃薯青枯病等方面也有报道[2~5],但在设施韭菜的应用效果研究上尚未见相关报道。本研究采用传统稀释平板法和Biolog-ECO微平板技术,通过多次试验,研究了恩益碧(NEB)对设施韭菜根围土壤微生物多样性及生长和产量的影响,旨在为恩益碧能更广泛地应用于多种作物、更好地解决连作障碍和防治重茬病害提供有利的理论依据。

1材料与方法

1.1试验材料

①供试药剂恩益碧(NEB)(根施型,美国根茂公司生产);阿姆斯复合微生物肥(北京世纪阿姆斯生物技术股份有限公司生产);生化黄腐酸BFA浓缩抗丰剂(深州市盛华生物科技有限公司生产);微生物菌剂(中农绿康生物技术有限公司生产)。

②种植作物及品种试验地点为宁夏同心王团镇旱作节水高效农业科技园区的半地下式拱棚,种植作物为韭菜,品种为雪晶一号。

③供试土壤土壤采自宁夏旱作节水高效农业科技园区的半地下式拱棚设施韭菜的根围,土

壤pH值7.79,有机质含量8.42g/kg,全盐含量

3.00g/kg,全氮含量0.60g/kg,全磷含量0.56g/kg,全钾含量19.8g/kg,速效磷含量17.8mg/kg,速效氮含量65mg/kg,速效钾含量308mg/kg。

④培养基均使用选择性培养基,分离培养细菌用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、真菌用马丁氏琼脂培养基、放线菌用改良高氏1号培养基。

⑤主要仪器设备有立式电热蒸汽压力灭菌锅、烘箱、空气浴培养摇床、超净工作台、生化培养箱等。

1.2试验方法

①不同生物菌肥对设施韭菜根围土壤微生物多样性及生长和产量的影响(小区试验)a.试验设计。试验共设4个药剂处理,处理1:阿姆斯复合微生物肥(5kg/667m2);处理2:生化黄腐酸BFA

(1kg/667m2);处理3:微生物菌剂(4kg/667m2);处理4:恩益碧(8kg/667m2);另设不施药为空白对照(清水),每处理重复3次,共计15个小区,随机区组排列,试验小区面积为18m2。

b.施药方法及时间。韭菜定植时间为2012年2月2日。施药采用撒施法,于第一茬韭菜割除后,即2012年4月11日在该韭菜茬上分别撒施不同药剂处理后进行滴灌水。

c.不同生物菌肥对设施韭菜土壤微生物多样性的影响。土样采集方法:采用五点取样法,分别对不同处理设施韭菜的近根部土壤取样,采集深度为0~15cm,将不同位点的土样混匀后装入保鲜袋内密闭,带回实验室内进行土壤微生物种类分离和数量测定。土样采集时间为5月7日(药后26d)。

土样分离方法:采用稀释平板法。取10g番茄植株根际土,加入装有100mL灭菌水的250mL三角瓶中,制成10-1稀释液,放入25℃、160r/min的摇床上震荡15min后取出,取其上清液依次制成10-5~10-2稀释液,无菌条件下分别取不同稀释浓度的番茄根际土悬液1mL,加入到装有15mL冷却至约45℃选择性培养基的灭菌培养皿中,迅速混匀后静止,每处理重复3次。待培养基凝固后倒置,放入28℃生化培养箱中培养3~7d,取出后进行设施韭菜根围土壤细菌、真菌、放线菌3大菌群的菌落分离计数,并分别计算每1g干土中不同种类韭菜根围土壤微生物的数量。

d.不同生物菌肥对设施韭菜生长和产量的影响。施药后于作物生育期内分别测定不同处理下设施韭菜的株高(30株/小区)、小区产量,并定期观测病虫害发生情况。

②恩益碧(NEB)对设施韭菜根围土壤微生物多样性及生长和产量的影响(大区试验)a.试验设计。将上述小区试验筛选出的效果较优的NEB药剂继续进行大区试验,测定其应用效果,大区面积为53m2,施药剂量为8kg/667m2,并设不施药为空白对照。

b.施药方法。施药采用撒施法,于第二茬韭菜割除后,在该韭菜茬上撒施NEB药剂并灌水,依据不同茬次施药时间分别为2012年5月18日、6月30日。

c.NEB对设施韭菜土壤微生物区系的影响。土样采集方法、土样分离方法等均与上述小区试验相同;土样采集时间为2012年6月4日、7月11日、8月3日。

d.NEB对设施韭菜根围土壤微生物群落功能多样性的影响。土样采集时间为2012年8月3日。采用Biolog-ECO微平板方法测定。具体试验方法:称取10g鲜土(称量前测量含水量),加入90mL无菌生理盐水中,在摇床里振摇30min,静止沉淀3~5min,然后稀释100倍。将制备好的菌悬液倒入无菌移液槽中,使用八孔移液器将其接种于微平板的96孔中,接种量为150μL/孔。接种好的微平板用保鲜膜包裹,保鲜膜上用注射针头扎若干个小眼,以保证微生物培养所需要的氧气,将微平板放到铺有纱布的塑料饭盒中,为防止微平板鉴定孔中的菌悬液挥发,纱布应保持一定的湿度,将微平板放入30℃恒温箱避光培养。

数据统计分析:每24h读数1次,连续7d,利用Excel和DPS软件对ECO结果进行统计分析。每孔平均颜色变化率(AWCD)计算方法:AWCD=

∑(C-R)/n,其中,C为处理每个碳源孔的光密度值,R为对照孔的光密度值,n为培养基碳源种类数。

e.NEB对设施韭菜生长和产量的影响。施药后分别于不同时期测定设施韭菜的株高(50株/大区)、大区产量,并定期观测病虫害发生情况。

2结果与分析

2.1不同生物菌肥对设施韭菜根围土壤微生物多样性及生长和产量的影响(小区试验)

①不同生物菌肥对设施韭菜根围土壤微生物多样性的影响施用不同生物菌肥26d(5月7日)后,采集不同处理土样进行设施韭菜根围土壤微生物种类和数量测定。由图1可知,与空白对照相比,各处理土壤细菌、真菌和放线菌数量均增加,尤其是细菌数量增加较为明显,微生物总量也呈明显增加趋势,说明施入生物菌肥有利于设施韭菜土壤微生物的繁殖和数量增加。从各处理来看,NEB处理使土壤中细菌、真菌、放线菌数量增加最快,其次是微生物菌剂和BFA处理。

②不同生物菌肥对设施韭菜生长及产量的影响从表1测定结果可看出,各处理株高、小区产量均高于对照,植株长势良好,其中NEB处理表现最好,株高平均增加5.3cm、小区产量增加1.0kg/18m2、增产率达13.3%,且在韭菜生育期内没有发现典型的有害生物发生,这可能也与设施韭菜种植时间较短有关。

2.2恩益碧(NEB)对设施韭菜根围土壤微生物多样性及生长和产量的影响(大区试验)

①NEB对设施韭菜根围土壤微生物区系的影响由图2可知,分别于2012年5月18日和6月30日施药后,在不同时期内所测定的NEB处理土壤微生物数量均明显高于空白对照,其中土壤细菌数量呈持续上升趋势,真菌呈先下降后快速上升趋势,而放线菌呈现持续降低趋势。说明施入NEB能够刺激设施韭菜根围土壤微生物数量显著增长,且NEB本身也含有大量的有益菌群,对土壤中微生物具有活化作用,可提高土壤微生物活性,改善土壤微生态环境的结构和功能,并抵制设施韭菜根围土壤有害生物的发生。

②NEB对设施韭菜根围土壤微生物功能多样性的影响微生物代谢强度采用平均吸光度AWCD来描述,从设施韭菜土壤微生物群落利用全部碳源的动力学特征图3可看出,随着培养时间的延长,土壤微生物群落利用全部碳源的量总体呈上升趋势,且NEB处理对全部碳源利用的AWCD值均明显高于空白对照,说明施入NEB能更迅速地提高土壤微生物对碳源的利用能力,从而使土壤微生态环境朝着更有利于作物健康生长的方向发展。

从表2可看出,NEB处理土壤中微生物群落功能多样性与空白CK相比存在一定差异性,其中处理的丰富度、多样性指数、均匀度均比对照高,表现出了一定的优势,说明施用NEB后,设施韭菜根围土壤微生物群落结构组成和代谢功能多样性发生了不同程度的变化。

③NEB对设施韭菜生长和产量的影响表3测定结果表明,NEB处理的株高、产量均高于对照,株高平均增加4.1cm、大区产量增加3.2kg/53m2、增产率达11.3%,植株长势良好,在韭菜生育期内没有典型的有害生物发生,说明该药剂具有较好的抗病虫、抗重茬、壮根、增产增收等效果,同时也可能与韭菜种植时间较短有关。

3结论与讨论

本研究利用传统稀释平板法和Biolog-ECO微平板技术,通过多次试验,筛选出了防治设施韭菜连作障碍效果较优的恩益碧(NEB)生物菌肥,试验结果表明,施入恩益碧(NEB)能够使设施韭菜根围土壤中的细菌、真菌、放线菌数量增加,尤其是细菌、放线菌繁殖速度较快,真菌数量增加与添加丛枝泡囊菌有一定的关系;施入NEB后,土壤微生物群落对全部碳源的利用率较强,且土壤微生物群落丰富度、多样性指数、均匀度也表现出了一定的优势;NEB也能促进设施韭菜生长发育,起到壮根、增产、抗重茬和抗病虫等功效。

恩益碧(NEB)是美国根茂公司研制生产的一种包含丛枝泡囊菌根的有机生物高科技产品,具有“三多”(多生根、多开花、多结果)、“六抗”(抗重茬、抗病害、抗虫害、抗旱、抗寒、抗早衰)、耐涝、早熟、解磷、解钾等多种功能,是目前解决重茬病害的最好产品之一。NEB能够缓解或解决重茬病害,主要是通过其所依赖的丛枝泡囊菌根[6],使作物根系延伸,促进根际有益微生物群落大量繁殖,使作物形成良好的根际微生态环境,分解或者转化前茬作物所产生的毒素,减缓重茬种植的自毒现象,提高作物抗病、防病能力,使重茬作物健康生长。此外,丛枝泡囊菌根真菌也可占据作物根表,抢先吸收有害菌的营养,分泌抗生素,抑制或杀死有害菌。本研究中设施韭菜虽暂无重茬病害发生,这可能与韭菜连作年限较短有关,但本试验各项测定结果表明了施用NEB确实能够很好地改善设施韭菜根部土壤微生态环境,使其向着对作物生长有利的方向发展,今后将会继续进行深入研究。

参考文献

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土壤灭菌方法篇4

其实土壤中本来就有很多具有生物防治潜力的有益微生物,不仅可以对病原菌进行有效的拮抗抑制,而且还有促进植物生长和增产的作用。江木兰等从油菜植株体内分离出的内生枯草芽孢杆菌by-2可以使油菜核盘菌菌丝细胞浓缩变短,细胞壁破裂,原生质外溢,从而抑制真菌生长发育和菌核萌发,其抑制率高达60%~70%。boer等研究表明,假单胞菌菌株pseudomonaswcs358可以强烈分泌嗜铁素,与病原菌竞争fe3+/,从而抑制萝卜枯萎病。赵国其等用绿色木霉处理西瓜幼苗,能有效增强瓜苗长势,使其根系发达,以抑制西瓜枯萎病菌生长。另外毛壳菌可以有效降解纤维素和有机物,对土壤病原菌有拮抗作用。

微生物之间的竞争非常剧烈,主要包括营养物质的争夺、氧气的竞争和生态位点的抢占。铁元素是生物细胞酶系统的必需成分,生命体需要从外界获取fe3+作为酶的辅基和电子传递受体,以维持其新陈代谢。只要我们切断了病原微生物获取铁的途径,就可以有效防治土壤生物污染。而事实上有很多微生物如荧光假单胞菌cs121能分泌强力结合fe3+的嗜铁素螯合物,其强大吸收铁的竞争力促使土壤病原菌由于得不到足够的铁而不能正常生长繁殖。还有二硫化碳能够减弱土壤对木霉的抑制作用,木霉菌大量繁殖并竞争营养物和产生毒性物质,进而饿死和杀死有害细菌病毒,收到生物防治的效果。还有一些拮抗细菌会寄生在病原菌身上,吸取其营养,抑制其生长,例如木霉还可以缠绕在立枯丝核菌身上,抑制其菌丝生长,使病原菌细胞解体。

然而,生物防治大多具有单一性,我们应该考虑通过几种微生物的联合协同作用,同时杀死土壤中多种病原菌,大大提高综合防治效果。

6.3.2植物防治

据研究,植物根系分泌物对某些病原菌也有抑制作用。根系分泌物包括大分子有机物,如糖、蛋白质、酶和凝胶,还有小分子酸、酚、铜以及一些生长激素和黄酮等,其中有一部分或其进一步的分解产物具有化感作用。如小麦根系分泌物能直接抑制小麦全蚀病原菌的菌丝发育。化感物质还可以抑制土壤的硝化作用,对一些通过硝化作用获取物质和能量的病菌也有很好的防治效果。这启发我们是不是可以找到某些特殊植物,它们的根系分泌物能有效抑制土壤病原菌生长,从而达到植物防治的效果。

另外还有一个问题,二氧化碳浓度升高会不会对土壤微生物的活性产生影响呢?对于这个问题,学术界争论很大,其中fransson认为高浓度co2对土壤真菌有较大影响。从理论上来讲,co2浓度升高会增强植物的光合作用,其凋谢物和根系分泌物也可能会发生变化,进而改变土壤微生物的碳源和氮源等生长物质。研究发现,土壤有机碳含量越高,土壤抑病性越强。如果土壤中的co2浓度升高了,又会不会抑制微生物的呼吸作用或者改变土壤环境的ph,进而影响土壤微生物的生长繁殖。徐国强研究表明,co2浓度升高会促进土壤有机碳的输入,为土壤微生物提供更多的可降解底物,促进其活性,增强土壤呼吸作用,而又有研究说土壤呼吸率与土壤抑病性有关,呼吸率越高,作物发病率越低。如果真的是这样的话,我们是不是可以采取某种措施如熏烟等,增大土壤中的co2浓度,以抑制病原微生物生长。另外研究发现,土壤ph与土壤抑病性呈负相关,酸性越强的土壤抑病性越强。ph改变又会影响到土壤环境的氧化还原条件,改变一些微量元素如铁的价态或者浓度,减弱病原菌对这些元素的亲和力,抑制其生长,但同时会不会也威胁到植物的生长,有待进一步研究。一些专门吞食微生物的动物也可以是一个考虑的方向,蚯蚓的生理活动会改变土壤的理化性质,其分泌和代谢物会不会对土壤病原微生物产生影响也有待证实。

总的来说,我们应该加强管理污染源和对污染土壤进行末端治理,有必要切断各种病原微生物和寄生虫的传播途径。

首先要对粪便、垃圾和生活污水进行无害化处理。及时监测和控制灌溉水质量,采用辐射杀菌法或高温堆肥法灭菌,好气法进行微生物发酵,以消灭垃圾中的致病菌和寄生虫卵,用密封发酵法、药物灭卵法和沼气发酵法等无害化灭菌法处理粪肥,同时还要加强管理感染动物。

防止医院废水直接流入土壤,加强对工业三废的治理和综合利用,合理使用农药和化肥并积极发展高效低毒低残留的农药。

另外我们可以改变土壤的理化性质和水分条件来控制病原微生物的传播,加强地表覆盖以抑制扬尘,切断致病菌的空中传播途径,还可以直接对土壤施药灭菌和杀毒。

不过最重要的是我们应该注意饮食卫生,生吃水果和蔬菜之前要彻底洗干净,蔬菜多洗几次,水果尽量去皮,不直接接触污染土壤,勤洗手,同时还要加强锻炼,增强身体抵抗力,以降低染病几率。

7.土壤生物污染的展望

随着农业技术的进步,广谱、高效、微量和低毒的灭菌杀毒药物不断出现和更新,能有效治理土壤生物污染,生物防治方法也成为一个重要的研究方向。另外以细胞工程和发酵工程等生物技术为核心的微生物肥料及其产业化不仅收到了巨大的经济和社会效益,而且还产生了重大的生态环境效益。

中国农业科学院土壤肥料研究所根据以菌治菌和以肥抗病的原理,经过多年试验研发出具有肥药多效性的新一代微生物肥料,即联抗生物菌肥。它利用微生物的生命活动及其代谢产物去为农作物提供营养元素等生长物质,以改善农作物的养分供应,还可产生拮抗物质,从而抑制土壤病原菌的生长,达到提高产量、改善品质、减少化肥使用、减轻病害、提高土壤肥力和改善环境的目的。

联抗生物菌肥作为一种复合生物菌剂,含有多种从土壤中筛选出来能促进作物生长并抑制病原菌繁殖的菌种,不仅为作物提供养分以促进作物生长,还能产生拮抗物质以抑制土壤有害病原微生物的繁殖,收到很好的土壤生物污染防治效果。联抗生物菌肥提高了化肥利用率,减少化肥使用量,增强农作物的抗寒、抗旱和抗病能力,有效降低了农作物的发病率。在辣椒、黄瓜、水稻、小麦、烟草、棉花、梨和桃等作物上的试验证明,土传病发病率降低70%~93%,作物产量增加10%~33%,收到了良好的社会经济效益和生态环境效益。

8.结语

尽管土壤生物污染在我国的现状比较严重,尤其是许多水果蔬菜的微生物含量超标问题突出,造成这种情况也是因为我国工农业发展和医院增多,各种病原微生物和寄生虫经土壤感染植物,再通过食物链对动物和人体健康造成巨大危害。我们也不要过于悲观,随着科学技术的进步,多种先进可行的方法应运而生。土壤吸附作用能截留病原菌,一些化学试剂具有强大的杀菌消毒能力,有益微生物还可以通过竞争作用或者分泌抑制剂来遏制土壤病原微生物的生长,植物根系分泌物的化感物质在土壤生物污染防治方面也起到了很大作用。总之,我们要保护土壤环境,防治生物污染,让大家都能吃上健康放心的绿色食品。

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土壤灭菌方法篇5

关键词:石油残留污染;土壤;微生物修复

experimentalstudyofmicrobialremediationforoilcontaminatedsoilincentralplains

zhangsheng,chenli,lizheng-hong,zhangcui-yun,yinmi-ying,heze,

sunzhen-hua,malin-na,ningzhuo,zhangfa-wang(theinstituteofhydrogeologyandenvironmentalgeology,cags,shijiazhuang050061,china)

abstract:thelaboratorymodelingexperimentsoftheoilresiduepollutiondegradationinsoilwerecarriedout,whichusedtheoptimistictechniquesofin-situmicrobialcommunitiescombiningwiththephysicalandchemistrymethodsandtheexperimentalstudyofmicrobialremediationforoilresiduepollutioninzhongyuanoilfield.theresultsshowedthatdegradationratecouldreach62?27%-72?40%foroilcontentsof13420?0mg/kg,10220.0mg/kgand8660?0mg/kginpollutedsoilafter56dmicrobialdegradation,whichprovidedusthetechnologyandthefeasibilitystudyoftheremediationofoilresiduepollutioninsoil.

keywords:oilresidualcontamination;soil;microbialremediation

我国中原地区由于石油资源的长期大量开采利用,产生了一些环境问题。尤其是落地原油的污染已影响土壤的质量安全,特别是开采早期行成的石油污染,在土壤中经长期的自然降解许多易挥发和易降解的组分均已降解,土壤中残留的难降解石油组分仍大量存在,且危害性更大,土壤石油污染的防治研究工作已受到人们的广泛重视。jorgensen的试验显示,经生物堆埋,石油污染的土壤中石油可降低71%[1]。微生物修复技术主要机理是石油烃直接参与了微生物的生化反应,通过代谢作用降解土壤中的污染物[2]。土壤微生物修复技术的开发与研究已受到国内外学者的广泛关注[3-16]。目前已知能降解石油中各种烃类的微生物共有约100余属200多种,它们分属于细菌、放线菌、霉菌、酵母以及藻类[16]。本文利用优化土著微生物菌群辅以物理和化学方法相结合的综合修复技术,对土壤中长期残留石油污染进行降解模拟实验,取得了一些效果。该方法具有处理方法简单、费用低、修复效果好、对环境影响小、无二次污染、可原位治理等优点。因此,本研究为该技术的应用提供了技术支撑,具有重要的实际意义。

1实验材料和方法

1.1实验材料

化学试剂:mgso.4·7h.2o、nh.4no.3、cacl.2、fecl.3、kh.2po.4、k.2hpo.4、kcl、(nh.4).2so.4、caco.3、nacl、可溶性淀粉、蔗糖、乳酸、盐酸、酵母膏、牛肉膏、乙酸钠、琼脂、液体石蜡、石油醚、三氯甲烷等均为分析纯。

其它实验材料:新鲜马铃薯、濮阳徐镇镇石油残留污染土样等等。

添加剂:牛粪晾干粉碎(过2mm筛)在121℃灭菌30min。

实验用土壤样品采自河南省濮阳徐镇镇一废弃采油井周围,该油井1996年废弃距今已有十多年。样品采集从井口附近表层油泥至井口北部2m处,2m处采集表层0~25cm和50~60cm的土样,表层土壤为褐色粉土土壤,可见有含石油团块。土壤下层为土黄色粉土土壤。表层土壤中含有少量2~5mm的碎石,土壤湿容重为1?96~1?99g/cm?3;土壤干容重为1?61~1?72g/cm?3。自然含水量14?45%~24?14%;ph为8?27~8?9。井口附近表层油泥中残油含量在421200~?64800mg/kg,井口北2m外表层0~25cm处残油含量在?8320~27400mg/kg,混合平均后为13420mg/kg。下层50~?60cm的土样残油含量在21?4mg/kg。

实验用玻璃器皿:150ml、250ml具塞三角瓶,125ml、1000ml磨口细口试剂瓶,各种不同类型的细菌培养试管、培养皿、橡胶塞等。

主要仪器:qzd-1型电磁振荡器、kq218超声波清洗器、生物恒温培养箱、高速离心机、高压蒸汽灭菌器、无菌实验室、生化培养箱、hz150l恒温摇床培养箱、奥林巴斯生物显微镜、752n紫外可见光栅分光光度计、电热干燥箱及各种化学分析用玻璃仪器。

1.2测试方法

石油分析测试方法:为紫外分光光度法。

降解石油微生物细菌培养优选方法:土壤微生物细菌培养用《土壤微生物研究法》[17],和参考文献[18]-[20]介绍的方法,细菌初步鉴定用《常见细菌系统鉴定手册》[21]中的?方法。

1.3实验步骤

1.3.1石油降解菌的分离与优选

自然界的物质循环微生物细菌的生化作用是非常重要的一环,碳的循环也不例外。许多细菌就是碳循环的主要驱动因子之一,机理就是在细菌的作用下,将碳氢化合物降解为co.2和h.2o的整个过程,也是自然界对石油污染的自净功能的生态效应,对土壤和地下水环境保护具有一定的实际意义。据此用细菌的选择性培养基和富集培养基,对中原油田濮阳徐镇镇一废弃采油井石油残留污染土壤的样品进行菌种、菌群的培养分离,选择优化出实验用降解土壤残油的菌种、菌群。本次实验选择优化出的细菌初步鉴定主要为:假单胞菌属、微球菌属、放线菌属、真菌类(毛霉、曲霉)等菌群。

1.3.2土壤残油污染降解实验步骤

根据上述实验选出的降解残油污染的优势菌群,利用不同的培养基对所选出的各类菌群进行放大培养。各类菌群培养3~5d后进行混合培养,继续培养5~7d后作为相应的石油烃降解实验。进行模拟不同含量条件下土壤残油污染的微生物修复实验。实验装置为250ml具塞三角瓶。

土壤残油污染微生物降解模拟实验,用若干(按实验设计的数量)250ml具塞三角瓶,每个瓶中加入100g风干过?2mm筛含有不同残油含量的土壤样品。实验用土样考虑避免其它因素的影响,选用同一采样点的样品,只是采集60cm以上不同深度含油量不同土样,进行了一定的配制。不同残油含量的土壤样品制备如下:1号样为采样点表层0~25cm混合均匀后,测残油含量为13420mg/kg。2号样为1号样加入同一采样点下层50~60cm的土样20%混合均匀后,经测试残油含量为10220mg/kg。3号样为1号样加入同一采样点下层50~60cm的土样35%混合均匀后,经测试残油含量为8660mg/kg。每个样品均匀接入3ml培养好的菌液,加入30ml营养液,营养液按培养基成分比例调控氮、磷、钙、镁、硫、铁等营养元素,营养液均匀加入,调节试验土层含水量在25%左右。按30℃温度条件进行实验,一定的间隔时间取出约1g左右样品,50℃~60℃烘干研碎,分析土壤中石油的降解去除的含量。在实验中每次取样时要将剩余的实验瓶塞打开一下约3~5min并搅拌,以利于氧气进入,使实验过程中有足够的氧,并保持实验装置内土样有一定的含水量。在第1号实验样品中为增强细菌的作用利用牛粪晾干粉碎过筛灭菌后作为添加剂,添加量为1%。该添加剂有两个主要作用,一是牛粪中主要成分为未分解的木纤维素,可为改良土壤的膨松剂,另外是其它有机成分,可作为细菌容易利用的营养素来源,其它实验条件同其它。在一定时间取样测试石油含量的变化。

2实验结果与讨论

不同土壤残油含量降解野外实验,是在2009年4月16日至6月12日进行。考虑研究区地表土壤春、夏、秋温度一般在20℃~30℃左右,选择了30℃温度进行实验。实验结果见

从上述3个实验条件来看差异不是很大,仅有两点不同,一是1号样添加了1%的灭菌牛粪作为添加剂,二是石油残油量不同,其它实验条件一样。但是对石油残油的降解率还是有影响的,1号样添加了1%的灭菌牛粪作为添加剂,改良了土壤,另外它增加了细菌利用的营养来源加大了降解能力。其石油残油量不同,因加入的营养量是一样的则降解效果?不同。

实验结果显示,微生物细菌对土壤石油残油污染确有一定的降解作用。表1、表2显示,虽然实验选择了不同的残油含量的土壤进行,实验效果也有一定的差异。1号样残油含量最高,因其加入了1%的添加剂牛粪,从测试结果看虽然降解率是低了一点,但在相同其它条件下它的降解量是最大的,牛粪改良了土壤,增加了细菌利用的营养来源加大了降解能力。残油量在13420mg/kg经56d降解率达62?67%。2号、3号样因其残油含量不同降解率有一定的差别,2号样残油量在10220mg/kg经56d降解率达63?89%。3号样残油量在8660mg/kg经56d降解率达72?40%。从2号、3号实验结果看,在相同实验条件下残油含量越低降解效果越好,其原因是微生物细菌在同等条件下所利用的营养资源量不同。从整个实验看土壤中因石油的长期残留污染,易降解的石油组分早已自然降解,残留的组分是较难降解的有一部分是很难降解的,如沥青等组分。本次实验结果同前期的降解实验结果对比也有很大的差异,前期实验是用的新鲜原油加入实验体系中,一般在相同条件30d可使石油降解率达85%~95%以上。而本次实验是在56d实验,时间延长了近一倍,残油的降解也只有62?67%~72?4%,也就是说石油污染土壤中的残油确实较难降解。但是,只要是将实验条件和微生物菌群优化选择好,其残油降解还是有较好的效果,从3组实验结果也得到了相互验证。

天然土壤中含有丰富的微生物,具有潜在的降解石油污染物的能力。且可降解石油的细菌在多年连续的污油中不断驯化,具有较强的降解石油污染物的潜力。采用投加从原来土著体系中筛选出的微生物进行生物强化,能克服其他外源菌所面临的存活力较弱、与土著微生物之间可能存在竞争关系等一系列问题,且这种生物强化技术操作简便,实用性强,在生物修复方面具有较广阔的应用前景。石油是由上千种化学性质不同的物质组成的复杂混合物,用单种微生物细菌很难将其彻底降解,目前在石油污染的生物处理上,越来越多的国内外学者采用细菌菌群进行生物处理。如何能消除菌群种间的抑制作用,构建出优势混合菌群是目前菌群研究所要解决的一个问题,也是本实验研究的目的之一。本次实验通过对石油残油污染土壤微生物修复方法的模拟实验研究,利用优化原位土著微生物菌群辅以物理和化学方法相结合的修复技术,进行了实验温度、水、氧气、营养元素等的调控,对土壤中残油的降解实验,实验验证了微生物修复技术在土壤石油残油污染降解的有效性和应用的可行性。为野外原位试验提供了经验,奠定了基础,积累了技术。

3结论

通过上述降解实验,微生物细菌对土壤石油残油污染的修复是有较好的降解作用。虽然实验样品土壤石油残油含量不同,实验效果还是有一定的差异。1号样利用牛粪晾干粉碎作为添加剂,增加了细菌的营养来源,增大了去除效果。2号、3号样在同等实验条件下残油含量低降解效果好,得到了相互验证的效果。从整个实验过程可得出土壤中石油残油含量在?13420mg/kg、10220mg/kg、8660mg/kg、时,经过56d微生物降解实验,土壤中石油残油含量降解可达62?67%、63?89%、72?40%,为土壤石油残油污染的修复提供了技术方法和应用的可行性。验证了本次实验调控添加的营养元素和对土壤环境的改善是比较适度的,方法是可行的。具有处理方法简单、费用低、修复效果好、对环境影响小、无二次污染、可原位修复等优点。虽然是实验研究,用于野外大面积修复还有待完善,但通过不断努力是可以实现的,是具有较好的应用价值。

参考文献:

[1]jorgensenks,puustinenj,suorttiam.bioremediationofpetroleumhydrocarboncontaminatedsoilbycompostinginbiopiles[j].environmentalpollution,2000,107(2):245-254.

[2]debontjam.solvent-tolerantbacteriainbiocatalysis[j].trendsbiotechnol,1998,16:493-499.

土壤灭菌方法篇6

论文摘要:日光温室蔬菜连作,造成土壤养分积累和养分失衡,导致蔬菜产量低、品质差、生理病害严重。要解决日光温室蔬菜连作问题,必须做到设施蔬菜土壤的科学施肥及管理、在棚室应用地膜覆盖高垄栽培方法以及科学防治病虫害。

朝阳市是北方设施蔬菜生产最重要的基地之一,产品销往全国各地,部分出口国外。但由于土壤连年集约化生产,大量施用化肥,加之大棚覆盖土壤得不到充分的降雨淋洗,造成土壤盐分积累和养分失衡,导致蔬菜产量低、品质差,生理病害严重。要解决这一问题,必须采取科学施肥及栽培管理措施。

1设施蔬菜土壤的科学施肥及管理

1.1增施有机肥

最好施用纤维素多即碳比高的有机肥(如秸秆沤肥、沼肥等),有机质在腐解的过程中,会形成腐殖酸等有机胶体,而胶体中胶粒带负电,具有很强的吸附特性,能把可溶性的矿质养分,如铵离子、钾离子、钙离子等阳离子吸附在自己周围,这种吸附是动态的,当土壤溶液浓度降低时又会释放到溶液中。由此可见,增施有机肥料,可大大增强土壤的养分缓冲能力(即协调能力),防止盐类集聚,延缓土壤的盐渍化进程。

1.2推广施肥的科学检测

有条件的地方,可用电导仪监测土壤溶液浓度,超过一定的EC值,蔬菜就要发生生育障碍,如发现接近临界值就停止;植物在工厂化育苗时,更应该注意EC值的控制,否则易造成僵苗。

1.3加深土壤的翻耕

保护地土壤的盐类集聚呈表聚型,即盐类集中于土表层。在蔬菜收获后,进行深翻,把富含可卡因类的表土翻到下层,把相对含盐较少的下层土壤翻到上面,可以大大减轻盐害。

1.4撤膜淋雨溶盐或灌水洗盐

待夏熟菜收获结束后,利用换茬空隙,揭去薄膜,在雨季如有数十天不盖膜,日晒雨淋,对于消除土壤障碍是一项简易可行的有效措施,不仅可以洗盐,而且可以杀灭病菌,有利于下茬的高产稳产。

1.5基肥深施,追肥限量

用化肥作基肥时进行深施,作追肥时尽量“少吃多餐”,最好将化肥与有机肥混和施于表土以下,以免过多增加表层土壤的含盐量。追肥一般较难深施,故应严格控制每次施肥量,宁可用增加追肥次数的方法,也不可一次施肥过多,以免提高土壤溶液的浓度。

1.6提倡根外施肥

根外施肥不会增加土壤的盐分,应当大力提倡,特别是尿素、过磷酸钙以及磷酸二氢钾,还有一些微量元素,作为根外追肥都是适宜的,效果较快。

1.7地面覆盖

用地膜或秸秆进行地面覆盖,对于抑制土表积盐有明显作用。据试验,用锯木屑、稻草、地膜、菜叶等覆盖于表土上,能降低土表盐分含量,保持田间土壤湿度,其中地膜和锯末屑的降盐效果最好。

2地膜覆盖高垄栽培在棚室的应用

2.1整地施基肥

按所种蔬菜要求,一般施农家肥60~75t/hm2,并根据土壤矿质元素含量配合施用适量的磷、钾肥,地面撒施后耕翻,深度35cm左右。

2.2作垄挖沟

采用双行带状栽植,与普通种植不同的是双行之间要留灌水沟,如茄子、黄瓜、番茄,大行60~80cm,小行50~60cm,水沟上宽30~40cm;甜椒、辣椒,大行50~60cm,小行40~50cm,水沟上宽20~30cm。先在步道上取少量土分放于作垄部位,再于双行中间挖沟,将土分放垄上,用耙将垄顶整平,沟两侧轻压,作好后,垄高15~20cm。

2.3覆膜

南北覆膜,膜宽1.5~2.0m,0.9m宽的用2幅,厚0.008~0.010mm,膜间搭接5~10cm,可先压两头,也可分段压土,步道上少量压上,这样可使膜充分张紧,不致下陷。

2.4打孔栽植

用与苗根土坨大小相当的打孔器打孔,选壮苗栽植,注意把苗根周围按实,打孔处要覆适量土将膜压住保护苗茎。

2.5灌水

栽后立即灌水,水从沟中流入,沟一端开口于地面垄沟,一端止于畦尾,灌后开口用土压住。灌水时注意选用3.0~4.5cm自吸泵或潜水泵,水流不应过急,如水量大可同时开2~3个,使水从侧方慢慢渗透整个高垄。

2.6施肥

在蔬菜生长期间需施肥时,可于株间打孔施入,施后用少许土将孔压埋,或将肥料混于水中,随水流入沟中。在北方“四位一体”日光温室中,应用加肥器使沼液随水一同灌入,此法操作简单易行,灌水后不破坏土壤结构,步道、垄面不见水,而根系已被侧方渗透,使根不致处于泥泞状态,保证根系的正常呼吸和生长。由于覆盖地膜,日平均提高地温1.8~3.0℃,更利于蔬菜的生长,水分受地膜阻挡,又不致大量蒸发到空气中,对空气湿度增加不大,棚膜上形成水滴少,提高光照强度,早晚提高棚温3~5℃,减少病害的发生,如黄瓜霜霉病、枯萎病,发病率显著降低。应用地膜高垄沟灌栽培的大棚番茄、黄瓜、甜椒相比普通整畦漫灌栽培,具有坐果早、产量高、品质好、病虫害少等优点。

3病虫害科学防治

3.1物理措施

近年来,通过反复实践,已摸索出一套不施农药防治蔬菜病虫害技术,当地习惯称为“健康栽培法”,减少病菌侵染来源,有效控制蔬菜害虫发生,减轻病害传播,不仅减轻了蔬菜的农药污染,降低了成本,而且有利于生产无公害蔬菜,发展蔬菜出口贸易。

3.1.1晒种、浸种。温汤、盐水浸种,在播种前,选择晴日将蔬菜种子晒2~3d,可利用阳光杀灭附在种子表面的病菌,减少发病。瓜类、茄果类蔬菜的种子用55℃温水浸种10~15min,豆科和十字花科蔬菜的种子用40~50℃温水浸种10~15min,都能起到对种子消毒杀菌作用,预防苗期发病。用10%盐水浸豆科种子10min,可将种子里混入的菌核病菌、线虫卵漂除和杀灭,防止菌核病和线虫病发生。

3.1.2用太阳能进行高温消毒杀菌。常用的是蔬菜大棚的高温闷棚。在夏秋季节,利用大棚闲置期,采取覆盖塑料棚膜密闭大棚,选晴天高温闷棚5~7d,使棚内最高气温达60~70℃,可有效地杀灭棚内及土壤表层的病菌和害虫。

3.1.3挡避和诱杀害虫。于棚室的通风口处设置防蚜网,阻挡有翅蚜、粉虱等害虫迁入棚内。若棚内已发生蚜虫、白粉虱,可在棚内设置黄油板诱杀,方法是利用废旧的纤维板,截成1.0m×0.2m长条,用油漆涂为黄色,再涂上1层粘油(可用10﹟机油加少许黄油调匀),设置375~450块/hm2,置于行间可于植株高度相同,当蚜虫、白粉虱粘满板面时,需及时重涂粘油。园区可采用灯光波、色板、性诱剂等多种方法。

3.1.4高温堆肥杀灭病菌和害虫。蔬菜基肥以有机肥为主。农家肥中多带植物病菌和虫害,在施前1~2个月可将其泼水拌湿、堆积和严盖塑膜,使其充分发酵腐熟,在发酵期堆内温度高达70℃左右,可有效地杀灭病虫害,“四位一体”温室沼肥是相对安全的,可在空气通风处,放置2~3d直接使用;并且腐熟后肥料施入棚内,不会发生蔬菜烧根和有毒气体危害等不良现象。

3.2农业栽培措施

3.2.1轮作换茬和清洁田园。各种蔬菜实行2~4年以上的轮作换茬,都有减少和减轻病虫害的明显效果,并有明显增产作用。将病残体、病果全部带出棚外,销毁或深埋,可减少病害基数,尤其是前茬作物腾茬后,彻底打扫清洁田园,再结合高温闷棚,能有效防治下茬蔬菜病虫害。

3.2.2增施有机肥和配方施肥。在增施有机肥的基础上,再按各种蔬菜对氮、磷、钾元素养分需求的适宜比例,进行配方施用化肥,不仅能改善土壤营养状况,促进蔬菜作物生育健壮,还可增加蔬菜抗病能力,增加产量和提高品质,减少施药次数和施药量。

3.2.3实行垄作和地膜覆盖栽培。大棚蔬菜实行起垄定植,地膜覆盖,既便于膜下沟里浇水,减少土壤蒸发量,降低棚内空气湿度,抑制蔬菜病害的发生发展,又可防止土壤病菌的传播,从而减轻病害的发生。

3.3利用生态环境防止蔬菜病虫害

生态环境是利用蔬菜与病菌生长发育对环境条件的要求不同,创造有利于蔬菜生长发育而不利于病虫害发生发展的生态环境条件,就可减少和减轻病虫害发生。例如:霜霉病、灰霉病和白粉病等,在高于32℃和相对湿度低于80%的条件下,病菌不发生或发生缓慢,喜温蔬菜的适宜光合温度为18~28℃,且上午8~12时完成光合量的70%~80%。因此,在生态上采取上午适当早揭草苫,延长光照时间,并注意适当通风,使棚内湿度不高于80%;午后闭棚,使短时间棚温升至35℃,以高温抑制病菌发生发展,然后再放风排湿,黄瓜霜霉病控制到43~45℃,在下午高温下排湿后,夜间棚内空气温度也相对较低,可减轻结露,有利于抑制病菌传播。

在大棚蔬菜冬春寒冷期间浇水,可采取“三不浇、三浇和三控”,即阴雨不浇,晴天浇;下午不浇,上午浇;不浇明水,浇膜下水;苗期控制浇水;连阴天控制浇水;低温时控制浇水。这样能有效地抑制病菌的发生和蔓延。

3.4利用蔬菜制剂防治虫害

3.4.1黄瓜蔓。将新鲜瓜蔓1kg,加少许水捣烂滤去残渣,用滤出的汁液加3~5倍水喷洒,防治菜青虫和菜螟的效果达90%以上。

3.4.2苦瓜叶。摘取新鲜多汁的苦瓜叶片,加少量的清水,捣烂榨取原液,然后每1kg原液中加入1kg石灰水,调和均匀后浇灌植株幼苗根部,防治地老虎有特效。

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