化学品毒性化学分析(6篇)
时间：2024-09-12
时间：2024-09-12
[关键词]附子；生物评价；心脏毒性；室性早搏；最小中毒量；质量控制
[Abstract]AconitiLateralisRadix（Fuzi）isatoxictraditionalChinesemedicinewithdefiniteefficacy.Inordertoimprovethequalitycontrolofitsdifferentpreparedproductsandensurethesecurityinclinic，itissignificanttoestablishamethodofqualityevaluationrelatedtoclinicadverseeffects.Aimingattheimportantbiologicalmarkerofearlycardiactoxicityreaction，therewasnomethodtodetectit.Inthismanuscript，anovelapproachformeasuringtheminimaltoxicdose（MTD）ofprematureventricularcontractions（PVC）poisoningofratswasestablished.Then，thedeterminationmethodologyandconditionswereoptimizedtomeettheneedsofthequalityandbiologicalassessment，includinganimalsex，weight，stabilityofstandardsandtestsolutions.Usingthismethod，theMTDvalueofdifferentFuziproductsweredetermined，suchasHeishunpian，Baifupian，Zhengfupian，Baofupian，andPaotianxiong.TheresultsshowedthattheMTDofFuziwassignificantlydecreasedafterdetoxificationprocessed（P
[Keywords]Fuzi；biologicalassessment；cardiactoxicity；prematureventricularcontractions（PVC）；minimaltoxicdose；qualitycontrol
doi：10.4268/cjcmm20162017
附子是确有疗效的毒性中药。以参附注射液、四逆汤为代表的附子制剂，对于各种急、慢性心衰均具有显著疗效，奠定了附子在中医临床的特殊地位。然而，近十多年来，东亚地区几乎每年都有附子中毒的不良反应报道；究其原因，多与饮片质量密切相关[1-2]。通过文献和临床实际调查，发现附子及其炮制品导致的不良反应，除极个别特殊病例发生死亡，绝大部分都是饮片质量波动引起心律失常为主的心脏毒性[3]。附子的毒性成分主要是乌头碱类物质，具有强烈的心脏毒性。附子炮制后可显著降解剧毒的乌头碱类成分，起到炮制减毒的效果，保障临床应用安全性。文献研究表明，乌头碱中毒后，在哺乳动物心电图上依次表现为室性早搏、室性心动过速、心室纤颤、心室扑动以及停搏[4-5]，其中室性早搏是乌头碱和附子心脏毒性最早期的中毒标志。然而，目前尚缺乏针对这一早期心脏中毒反应的评价方法。因此，测定附子引起大鼠室性早搏的最小中毒量（MTD），可作为附子炮制品减毒程度和质量评价的重要参考指标。本文探索建立基于室性早搏MTD测定的附子炮制品质量生物评价方法，通过对测定方法学的研究，明确了相关的影响因素；以此为基础，评价了生附片、黑顺片、白附片、蒸附片、炮天雄、刨附片的生物毒性，为附子的质量评价与临床应用提供了新的思路与方法。
1材料
1.1药物
黑顺片、炮天雄、蒸附片、刨附片、白附片于2014年10月采购于四川江油中坝附子科技有限公司。经中国人民第三二医院肖小河研究员鉴定为毛茛科植物乌头AconitumcarmichaeliDebx.的子根加工炮制品。
1.2试剂
乌头碱对照品购于成都克洛玛生物科技有限公司，批号150322；二氯甲烷，乙酸乙酯，异丙醇，乙酸铵，浓氨，乙醇均为分析纯，购于北京化工厂；去离子水（自制）；乙腈（色谱纯，Fisher）；氯化钠注射液购于石家庄四药有限公司，批号15111103201；乌来糖（氨基甲酸乙酯）购于国药集团化学试剂有限公司，批号No20060227。
1.3仪器
RM6240BD型多道生理信号采集处理系统（成都仪器厂）；BYZ-810T注射泵（长扬医疗器械有限公司）；Agilent1200型高效液相色谱仪（四元泵，自动进样器及UV检测器）；GradientA10Mill-Q超纯水器（法国Millipore公司）；Sartorius-BS110S千分之一分析天平、1/10万分析天平（德国赛多利斯公司）；台式冻干机（北京博医康实验仪器有限公司）；超声波清洗仪（上海声彦超声波仪器有限公司）。
1.4动物
SD大鼠，SPF级，由中国人民军事医学科学院实验动物中心提供，动物许可证号SCXK-（军）2007-004。
2方法与结果
2.1测定方法与评价指标
2.1.1心电图的测定大鼠用20%乌来糖溶液（8mL・kg-1）麻醉，背位固定，连接电极用多道生理信号采集处理系统测定二导联心电图，描记正常心电图。注射器与头皮针相连，一端固定于微量注射泵上，另一端接于大鼠尾静脉中，以2mL・h-1恒速推注乌头碱溶液或附子炮制品提取液，观察并记录心电图的变化，直至出现心室早搏（PVC）的变化，即首次出现QRS波倒置及变宽，记录此时的推注体积。体积越小，样品毒性越强。大鼠正常心电图与室性早搏的心电图见图1。
2.1.2对照品溶液的制备[6]精密称取乌头碱对照品适量于棕色量瓶中，加无水乙醇超声并定容，配制质量浓度为200mg・L-1的对照品母液。取0.5mL于20mL离心管量瓶中，加生理盐水稀释、定容，即得质量浓度为5mg・L-1的对照品溶液。
2.1.3供试品溶液的制备称取附子供试品粉末约2g，加入70%乙醇20mL，超声提取30min（功率300W，频率40kHz，水温在25℃以下），离心（5000r・min-1，10min）分离上清液，加入70%乙醇定容至20mL。将提取液转移至蒸发皿中，置于通风橱中，待溶剂挥发至约1mL，转移并用生理盐水定容至2mL，生附子用生理盐水定容到5mL，即得供试品溶液。
2.1.4MTD计算方法对于对照品而言，出现室性早搏的MTD为推注乌头碱的质量除以大鼠的体重；对于附子饮片而言，出现室性早搏的MTD为推注饮片的质量除以大鼠的体重。
2.1.5统计方法采用SPSS22.0软件包对数据进行统计分析，2组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析；方差齐采用LSD分析，方差不齐采用Tamhane分析。
2.2基于室性早搏中毒量测定的方法学研究[7]
2.2.1动物性别的选择取体重为（200±20）g的SD雌雄大鼠各6只，实验前准确称重。以5mg・L-1的对照品溶液为测试液，按2.1项下方法测定乌头碱的最小中毒量，研究动物性别对毒性的影响，结果见图2。由图可知，雄性动物的MTD为10.25±1.43，组内RSD为13.95%；雌性动物的MTD为12.26±2.14，组内RSD为17.48%；尽管经统计分析，两者结果无显著性差异，但从RSD可看出，雄性动物的数据更集中，组内差异更小，有利于提高结果分析的准确度，故确定雄性大鼠为实验动物。
3.2化学含量与MTD相关性分析
依据图6测定的MTD数据与表1测得的生物碱含量数据，采用线性相关分析研究各成分与MTD的相关性。相关系数计算结果以热图形式表示，采用HemI软件作图，见图7。由结果可知，双酯型生物碱含量与MTD呈明显的负相关，单酯型生物碱对MTD的影响规律为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱，而苯甲酰次乌头原碱对MTD的影响微乎其微，这与上述单体成分的毒性强弱结果是基本一致的[11]。上述研究提示，附子炮制品致心律失常毒性主要与双酯型生物碱有关，同时，苯甲酰乌头原碱的作用也不可忽略。由前期研究可知，生附子中主要是双酯型生物碱，单酯型生物碱含量很低，加热炮制水解后，双酯型生物碱大量水解为单酯型生物碱，饮片中单酯型生物碱丰度很高，而双酯型生物碱丰度很低。尽管单酯型生物碱的毒性远弱于双酯型生物碱，但在饮片中，大量的单酯型生物碱仍对饮片的整体毒性有一定影响。这也说明，单纯采用《中国药典》的双酯型生物碱含量之和，并不能完全代表饮片的整体毒性，而本文提供的基于大鼠室性早搏心脏毒性的附子质量生物评价方法可作为有益补充。
4讨论
评价标准的科学性对于确保饮片质量至关重要。目前，关于附子毒性评价，主要分为化学评价与生物评价2种方法。化学评价以2015年版《中国药典》为代表，规定黑顺片、白附片中3种双酯型生物碱乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的总和不超过0.02%。但该方法存在一定问题：其一，3种成分不能完全代表附子的整体毒性，还存在其他的剧毒成分，如印乌头碱、3-乙酰乌头碱等；其二，3种成分的毒性并不相同，次乌头碱的毒性仅为乌头碱的1/3，三者之和简单相加缺乏依据[12]。生物评价以急性毒性的改良寇氏法为代表，通过测定灌胃后动物的半数致死量LD50或最大耐受量作为评价依据。但该法实验周期长，消耗动物量大，灵敏度也较低，很难满足生物测定的要求[13]。为了克服上述不足，课题组前期建立了通过大鼠尾静脉推注附子提取液，测定最小致死量的生物毒价评价方法[7]，并进一步建立了基于毒性系数校正的含量测定方法――附子毒性成分指数[14]，用于生附子的毒性评价。尽管这些方法快速准确，但主要适用于泥附子或生附子的整体毒性评价，而炮制品由于毒性较低，很多样品难以直接测出最小致死量[15]，需要建立新的检测更加灵敏的方法。
附子中乌头碱类成分多而复杂，其毒性强弱不能一一去表征，需在整体动物上评价附子毒性强弱。通过文献和临床实际调查，除极个别特殊病例发生死亡，绝大部分都是饮片质量波动以引起心律失常为主的心脏毒性。本方法在附子饮片的微毒评价中具有准确性、快速性、经济性等技术优势。首先，通过测定动物出现室性早搏的最小中毒量，能准确直观地表征附子饮片的毒性；其次，本方法在测定过程中，大鼠一般5min左右即出现室性早搏；而一般的HPLC，单样本的测定时间在60～90min[10]；而传统的改良寇氏法则需2周的观察周期[16]；本方法具有更快的检测速度，有利于多样本的快检。第三，由于本方法在测定过程中仅需测定最小中毒量，动物处于轻度中毒状态，并不死亡。而乌头碱等成分在体内的代谢速度较快[17]，待麻醉剂乌来糖及附子成分代谢完毕后，动物仍可重复使用，大大降低了实验动物的消耗，节约了检测成本，也更加符合实验动物的伦理与福利要求。此外，本方法技术难度小，无需特殊实验设备，有利于该方法的推广应用。
本方法的建立为附子、也可适用于川乌、草乌的早期心脏毒性评价提供了新的方法。①可用于附子配方颗粒的质量评价；在中药配方颗粒全面放开的条件下，如何确保免煎附子（黑顺片、淡附片）配方颗粒冲服时的安全性，中药质量易受多种因素影响[18]。如何快速识别评价产品质量（毒性）的一致性，更显紧迫性与必要性。②可用于不同商品等级黑顺片的质量评价；传统商品规格讲求辨状论质，黑顺片以片张大、乌黑油亮为佳，但市场流通的黑顺片大小、颜色差异明显，不同等级黑顺片毒性是否明显不同，值得探究。③可用于含附子注射剂的质量评价；注射剂静脉给药，较之于口服给药，安全风险相对较高，运用本方法在质检环节严格把关，将有助于控制药物风险，避免因原料质量或工艺因素波动造成的中毒反应。
综上所述，本文提出的基于室性早搏中毒量测定的附子早期心脏毒性评价方法是一种关联临床、直观准确、快速经济的生物毒性评价方法，有利于确保临床用药的安全可靠，为附子饮片或制剂的质量评控提供了新的研究思路与参考实例。
[参考文献]
[1]ChanTY.IncidenceandcausesofAconitumalkaloidpoisoninginHongKongfrom1989to2010[J].PhytotherRes，2015，29（8）：1107.
[2]ChanTY.Aconitumalkaloidpoisoningbecauseofcontaminationofherbsbyaconiteroots[J].PhytotherRes，2016，30（1）：3.
[3]ChongYK，ChingCK，NgSW，etal.Recipesandgeneralherbalformulaeinbooks：causesofherbalpoisoning[J].HongKongMedJ，2014，20（4）：343.
[4]张硕峰，吴金英，贾占红，等.附子中乌头碱对大鼠心功能效-毒剂量关系测定[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（19）：222.
[5]王懿，孙蓉.基于“回阳救逆”功效附子对小鼠心电图影响的“效-毒”关联评价[J].世界中医药，2014（2）：155.
[6]张定遥王伽伯，杨明，等.中药品质整合评控实践：附子品质综合指数[J].中国中药杂志，2015，40（13）：2582.
[7]QinY，WangJB，ZhaoYL，etal.EstablishmentofabioassayforthetoxicityevaluationandqualitycontrolofAconitumherbs[J].JHazardMater，2012，199/200：350.
[8]周海均.生物技术药物的最新进展[J].中国医药指南，2003（7）：46.
[9]张定遥韩雪，周永峰，等.附子精标饮片的研制（Ⅰ）：规格大小与质量均一性研究[J].中国中药杂志，2015，40（17）：3488.
[10]陈东安，易进海，黄志芳，等.附片指纹图谱研究及6种酯型生物碱含量测定[J].中国中药杂志，2010，35（21）：2829.
[11]张定遥韩雪，李瑞煜，等.UPLC-Q-TOF-MS分析不同产地泥附子化学成分的差异[J].中国中药杂志，2016，41（3）：463.
[12]张定遥杨明，韩雪，等.中药炮制工艺研究新策略：个性化炮制与过程控制论[J].中国中药杂志，2015，40（16）：3323.
[13]周子渝，熊永爱，黄勤挽，等.附子不同炮制品及其部位急性毒性研究[J].成都中医药大学学报，2012，35（3）：63.
[14]ZhangD，LiR，HanX，etal.Toxicconstituentsindex（TCI）：atoxicity-calibratedquantitativeevaluationapproachfortheprecisetoxicitypredictionofthehypertoxicphytomedicine-aconite[J].FrontPharmacol，2016，7：164.
[15]温瑞卿，李东辉，赵昕，等.基于化学分析的毒性中药附子炮制方法的合理性研究[J].药学学报，2013，48（2）：286.
[16]谢晓芳，彭成，易进海，等.附子不同炮制品提取物急性毒性的比较研究[J].中药与临床，2012，3（3）：29.
1临床资料
60例病人均为我院急诊科抢救病人，均有明确的吞服有机磷农药乐果病史，血浆胆碱酯酶活性均低于30%，无基础疾病。随机分为常规治疗组和“阿托品化定量观察指标”组（量化组）。入选60例病人就诊前均曾自行催吐，未予其他治疗，就诊时间均小于1小时。患者年龄、性别、服毒量见表1，经统计学处理差异无显著性（P>0.05）
2治疗方法
所有病人常规予以清洗去毒，脱去污染衣物，彻底清洗污染皮肤、毛发和指甲，彻底、反复洗胃、导泻，按病情给予阿托品、氯磷定并维持72小时以上至血浆胆碱酯酶活性恢复至大于70％。部分病人给予透析治疗。
3阿托品化判断标准及阿托品过量判断标准
3.1常规治疗组:阿托品化主要指征是口干、皮肤干燥、颜面潮红、瞳孔散大、心率加快90~100次/min、体温轻度升高、肺部音消失。
3.2量化组（见表2）
小于6分为阿托品不足，加大用量；6~9分已达阿托品化，控制用量；大于9分应警惕阿托品过量或中毒，减量[1]。
3.3阿托品过量判断标准：中毒早期语言及运动中枢高度兴奋、谵语、幻觉与精神症状，易识别，停药或减量后恢复较快；中毒晚期中枢高度抑制、昏迷、脑水肿甚至出现呼吸循环衰竭，瞳孔极度散大，眼底静脉血管显著扩张。
4疗效观察指标
4.1动态观察临床症状、体征、血浆胆碱酯酶活性，记录阿托品过量中毒发生率。
4.2疗效标准：痊愈：临床症状、体征消失，血胆碱酯酶活性恢复正常；好转：临床症状、体征消失，血胆碱酯酶活性接近正常；无效：抢救治疗无效或患者死亡。
5结果
两组病人疗效对比见表3，阿托品过量发生率对比见表4
表3结果表明常规治疗组改善率60.00%，量化组改善率83.33%，经X2检验，P
表4结果表明常规治疗组阿托品过量发生率60.00%，量化组阿托品过量发生率16.67%，经X2检验，P
6讨论
急性有机磷农药中毒(AOPP)是临床常见急症，死亡率高。阿托品是AOPP时最常用的抗胆碱药。其周围作用主要是竞争性阻断M-胆碱能受体（M-ChR），拮抗乙酰胆碱引起的毒蕈碱样效应。大剂量时对中枢M-ChR也有作用，对中枢N-胆碱能受体（N-ChR）无作用，对周围N-ChR作用极弱[2]。阿托品使用原则是迅速、适量、反复用药，在短时间内达到阿托品化[3]。关于阿托品的使用，长期的临床实践，按照教科书及有关文献，阿托品的使用并不完善，特别是对于重度口服中毒剂量偏低。受个例超大剂量抢救成功的影响，近年来，阿托品有滥用趋势。每天上千甚至上万毫克者非个别现象[4]。引起的过量、中毒、死亡现象屡见不鲜[5]。中毒发生率为40%~60%[6]，病死率为18.3%[7]。传统疗法治愈率低（20%~70%），病死率高（20%~80%）[8]。影响阿托品用量的常见原因:对于阿托品指征的掌握过于死板苛刻；对阿托品中毒认识不足；阿托品化后维持剂量的掌握及患者有其他基础病因是影响阿托品用法及用量的最常见的原因。阿托品化主要指征是口干、皮肤干燥、颜面潮红、瞳孔散大、心率加快、体温轻度升高、肺部音消失。临床实践中，不可能所有指征都出现[9]。瞳孔扩大和颜面潮红不是阿托品化可靠指标。对于阿托品化中口干、皮肤干燥、面色潮红、肺部罗音消失、HR100次/min左右应进行综合衡量分析，因个体差异不同，特别是患者具有其他基础病因时，切忌有某一症状、体征不符而盲目增大阿托品用量。阿托品化可靠指标是口干、皮肤干燥和心率90~100次/min[10]。“阿托品化简化指标”客观可靠，有利于抗胆碱药物合理应用[11]。阿托品化定量观察能更好指导阿托品应用。
参考文献
[1]王永健，石礼，肖振文，等.阿托品化定量观察在重度有机磷中毒救治中的应用研究[J].中国急救医学，2003，23（8）：583~584
[2][6]方克美，杨大明，常俊，主编.急性中毒治疗学[M].南京：江苏科学技术出版社，2002，53~54
[3]陈明华.重度有机磷中毒救治对策的探讨[J].临床荟萃，2000，15（19）：906~908
[4]郑动泉，宋尚时，李明秀，等.突击量氯磷定治疗急性有机磷中毒呼吸肌麻痹76例观察[J].中华内科杂志，2000，39（10）：655~657
[5]戴建溪，赵霞，王秀英，等.长效托宁治疗有机磷中毒的临床研究[J].中华误诊杂志，1999，3（6）：2502~2504
[7]赵德禄，主编.有机磷农药中毒问题答[M].北京：军事医学科学出版社，1999，110
[8]马秀英.国内急性有机磷农药中毒救治的现状[J].中国药学杂志，1995，30（5）：297~299
[9]邱泽武，田英平，申文凯，等.农药中毒诊治中42例阿托品中毒致呼吸肌分析[J].中国急救医学，2005，25（3）：183~185
[10]张文武，主编.急诊内科学[M].北京：人民卫生出版社，2000，508~512
关键词：六神丸；血浆药物化学；药物代谢；HPLC
中图分类号：R285.5
文献标识码：A文章编号：16749944（2017）12023704
1引言
六神丸是一种拥有100多年历史，享誉国内外的著名中成药。六神丸由六味药材配置而成，包括牛黄、珍珠、蟾酥、明雄黄、麝香、冰片。其具有清热解毒、消肿止痛的作用[1，2]，应用于咽喉肿痛、痈疡疔疮等。现代中药开发中，将六神丸应用于更多疾病，如消炎、镇痛、抗肝癌、抗肿瘤等[3～6]。对于六神丸成分的分析，曹阳等有相关报道[7～9]。本文基于对六神丸HPLC图谱的分析，旨在建立六神丸血浆药物化学的研究方法，从而为探究六神丸有效成分及其作用机制奠定基础。
目前对于中药复方六神丸的有效成分研究过于分散而缺乏系统性，仍不能明确有效的物质基础。中药血浆药物化学以中药口服后含药血浆为对象，综合应用多种现代技术，分析鉴定含药血浆中的移行成分，包括中药原型成分及其代谢产物，以研究中药在体内发挥作用物质[11]。药物无论经过何种代谢必须由给药部位进入血液循环，以血液为介质输出到靶点，从而产生作用，中药亦是如此。药物进入血液可能是其原形化合物，也可能是其代谢产物，还有可能是机体应激产生的活性物质发挥药效[12～15]。本实验通过对比分析空白血{、体内六神丸血浆、体外六神丸血浆、体内标准品血浆以及体外标准品血浆的HPLC-UV图谱，研究六神丸进入血液后的原形药物及其代谢成分的变化状况。以此逆向追溯六神丸药效活性物质群，有助于建立六神丸基于生物效应的品质评价指标。
2材料与试剂
2.1仪器
仪器选用分析型高效液相色谱仪（Ultimate3000Pump、Ultimate3000Autosampler、Ultimate3000ColumnCompartment、Ultimate3000DiodeArrayDetector）
2.2试剂
试剂包括：六神丸（上海雷允上药业有限公司，批号：140701），5-羟色胺盐酸（中国食品药品鉴定研究院，批号：111656），华蟾毒它灵（上海源叶生物科技有限公司，批号：p24N7F25514），蟾毒它灵（上海源叶生物科技有限公司，批号：p12O7F22619），蟾毒灵（上海源叶生物科技有限公司，批号：W05D6Z7090），华蟾酥毒基（上海源叶生物科技有限公司，批号：W10O7Z22424），酯蟾毒配基（上海源叶生物科技有限公司，批号：PJ0727RB13）。乙腈为色谱纯，乙酸乙酯（国药AR），其他试剂均为分析纯。
2.3动物
健康雄性SD大鼠，体重220g左右[湖北省实验动物研究中心，许可证号：SCXK（鄂）2015-0018]。动物实验员操作证号：TY20160044。
3方法
3.1六神丸灌胃药液及标准品灌胃药液的制备
将六神丸研磨成粉，称取一定量六神丸粉末，配制成8.0mg/mL的水溶药液，超声30min，使其充分溶解，于4℃冰箱保存，备用。
将华蟾酥毒基、酯蟾毒配基、蟾毒灵、蟾毒它灵、华蟾毒它灵配制成1mg/mL的水溶液，超声30min，使其充分溶解，于4℃冰箱保存，备用。
3.2体内六神丸血浆样品和空白血浆样品的制备
空白血浆的制备：健康SD大鼠4只，禁食12h，灌胃生理盐水，在1h后，将每只大鼠摘眼球取血，各5mL以上，置于含肝素钠抗凝剂的离心管内，备用。
体内六神丸血浆样品制备：健康SD大鼠3只，禁食12h，灌胃六神丸水溶液（36.0mg/kg）约1mL，给药1h后，每只大鼠摘眼球取血5mL以上，置于含肝素钠抗凝剂的离心管内，制备3份样品备用。
取以上制备的样品各5mL，加入25mL乙酸乙酯，漩涡混悬30s，3000r/min离心5min，取上清液；将沉淀再加25mL乙酸乙酯，旋窝混悬30s，3000r/min离心5min，取上清液。合并两次上清，挥干溶剂，在进样前加入300μL甲醇，使充分溶解后，用0.45μm的滤头过滤备用。
3.3体外六神丸血浆样品的处理
为减小药物与血液样品处理方法不同所带来的误差，取3.1节条件下制备的六神丸灌胃液1mL和5mL空白血浆混合，漩涡混悬30s，静置1h，按照血浆样品处理方法进行预处理，平行制备3份样品备用。
3.4不同时间点含药血浆样品的处理
健康SD大鼠15只，禁食12h，分成0.5、1、3、6、24h五组，每组三只大鼠，每组大鼠灌胃六神丸水溶液（36mg/kg）一次，约1mL，在给药后0.5、1、3、6、24h的时间点，每组大鼠摘眼球取血5mL以上，置于含肝素钠抗凝剂的离心管内。每份样品取血浆5mL，加25mL乙酸乙酯，漩涡混悬30s，3000r/min离心5min，取上清液；将沉淀再加25mL乙酸乙酯，旋窝混悬30s，3000r/min离心5min，取上清液。合并两次上清，挥干溶剂，在进样前加入300μL甲醇，使充分溶解后，用0.45μm的滤头过滤，制备得到15份样品，备用。
3.5体内标准品血浆样品的处理
健康SD大鼠15只，禁食12h，分成华蟾酥毒基、酯蟾毒配基、蟾毒灵、蟾毒它灵、华蟾毒它灵五组，每组3只，将3.1节条件下制备的标准品溶液给每组大鼠灌胃（5.0mg/kg）约1mL，每组给药1h后，每只大鼠摘眼球取血5mL以上，置于含肝素钠抗凝剂的离心管内。每份样品取血浆5mL，加25mL乙酸乙酯，漩涡混悬30s，3000r/min，离心5min取上清液；将沉淀再加25mL乙酸乙酯，旋窝混悬30s，3000r/min，离心5min取上清液。合并两次上清，挥干溶剂，进样前加入300μL甲醇，使其充分溶解，0.45μm滤头过滤，制备15份样品以备用。
3.6体外标准品血浆样品的处理
为减小药物与血液样品处理方法不同所带来的误差，取3.1节条件下制备的5种标准品样品各1mL，分别与5mL空白血浆混合，漩涡混悬30s，静置1h，按照血浆样品处理方法进行预处理。每种标准品平行制备3组备用。
3.7高效液相色谱条件
DIONEXultimate3000高效液相色谱仪；DIONEXC18色谱柱（250×4.6mm，5μm），流动相为乙腈（A）和0.1%三氟乙酸水溶液（B）。梯度洗脱，0～3min，5%（A）；3～13min，5%～12%（A）；13～15min，12%～20%（A）；15～25min，20%～30%（A）；25～30min，30%～51%（A）；30～50min，51%（A）；50～60min，5%（A）。体积流量1.0mL/min，进样量10μL，检测波长296nm，柱温30℃。
张妹砣，等：六神丸血浆药物化学的研究
生物与化工
4结果与分析
4.1六神丸入血后移行成分的分析
将空白血浆样品、体内六神丸血浆样品和体外六神丸样品在2.7色谱条件下进样，进样量为10μL。相对空白血浆样品的HPLC图，体内六神丸血浆样品的HPLC图中出现了14个移行成分，如图1。与体外六神丸样品比较，其中10、11、12、13、14号等五个成分保留时间与原型成分相同，可能为六神丸中所含的原型成分直接吸收入血。其中11号和12号移行成分相对其他成分含量显著较高，而体外六神丸血浆样品中所含的大部分原型成分在体内已明显下降甚至消失。其它9个成分为新产生的代谢产物，可能是六神丸中其他物质转化生产，也可能是体内应激反应产生的代x产物。六神丸灌胃后入血的14种成分为六神丸在体内直接作用物质，研究其变化规律将有利于进一步探究其活性成分和作用机理。
4.2六神丸入血后成分含量变化的检测
在3.4节条件下，制备不同时间点的体内六神丸血浆样品，在3.7节条件下进样，进样量为10μL。如图2-A所示，有部分代谢产物如10、11、12、14号移行成分含量逐渐增加，其中11号和12号移行成分随着时间延长，浓度显著增加，呈现浓度-时间依赖关系。以峰面积为纵坐标，时间为横坐标，建立关系曲线，如图2-B所示，可发现12号移行成分的浓度在6h累计达到最大值，之后随着时间延长呈缓慢降低趋势。11号移行成分的浓度随着时间延长不断增加。另一方面，随着时间延长，有的代谢产物逐渐减少如13号移行成分，有些甚至消失如5、6、9号三个移行成分。在24h时，还产生新的代谢产物15号成分。值得注意的是，增加的10、11、12、14号移行成分与六神丸中主要原型成分的保留时间十分相近，可能为原型产成分。而减少的5、6、9号物质应为新产生的代谢产物。由此可知，六神丸灌胃后，有的以原型入血，且不断通过其他成分转化或体内应激反应生成，使得含量不断增加。部分转化为新的代谢产物，由于缺少来源，逐渐减少甚至消失。而15号峰可能为体内应激反应产生的代谢产物。由此可见，六神丸的药效关系是复杂多变的，不是单成分代谢反应的叠加，而是受机体吸收、代谢及成分间相互作用的综合影响，使得中药复方六神丸比单味药、单体用药效果更显著。
4.3标准品入血后移行成分的分析
在3.5节条件下制备的体内标准品血浆样品，在3.6节条件下制备的体外标准品血浆样品，在3.7节的条件下进样分析，进样量为10μL。如图3所示，对比标准品在体外、体内的成分变化，发现六神丸中华蟾酥毒基、酯蟾毒配基、蟾毒灵、蟾毒它灵、华蟾毒它灵在
体内代谢后进入血浆的成分，主要为10、11、12、13号移行成分，主要转化为12号移行成分。将12号移行成分的峰面积与体外标准品的峰面积相比，推测华蟾酥毒基、酯蟾毒配基、蟾毒灵、蟾毒它灵转化成12号移行成分的转化率为：7.48%、2.93%、0.55%、0.94%。由此可见，华蟾酥毒基转化率相对最高，酯蟾毒配基的转化率次之，蟾毒灵的转化率最低，同时，华蟾酥毒基在体内转化为10、11号物质对应的峰面积也是最高的。这与六神丸体内代谢的移行成分的分析相契合，说明六神丸中的大部分成分在体内主要转化为12号类物质，发挥有效或制毒作用。在本实验室之前的工作中，发现六神丸醇提物对抗肝癌活性较六神丸水提物强[2]，对六神丸的各成分含量分析发现，在其他成分含量相当的前提下，六神丸醇提物中的华蟾酥毒基与酯蟾毒配基的含量是六神丸水提物的四倍，这与血浆中华蟾酥毒基与酯蟾毒配基的代谢分析相契合。推测华蟾酥毒基、酯蟾毒配基以及代谢生成的12号移行成分，可能是六神丸发挥作用的有效物质。
2017年6月绿色科技第12期
5结语
六神丸是传统中药名方，对其药物代谢研究得较少，对体内血浆药物化学鲜有报道。在血浆样品的制备中，对比了甲醇、乙腈、乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正己烷提取血浆中六神丸成分的效果，发现乙酸乙酯的提取效果最佳且稳定，对样品也不造成的干扰。每组制备的三份平行样品，相同条件下进样分析所得HPLC图谱相似，以其中最大峰为指标，测定峰面积的RSD值均小于5.32，说明本系统的方法稳定，具有重现性。
本文首次建立了体内六神丸血浆成分的HPLC图，并实现所有成分的有效分离，与体外六神丸的HPLC图进行对比分析，探索六神丸进入体内的成分代谢变化，利用标准品体内、体外的HPLC图对比，发现其都向12号物质移行，这体内六神丸血浆样品的主要成分分析相契合。这一现象的发现，部分揭示了六神丸入血后移行成分变化规律，为之后六神丸有效成分研究奠定基础，也为六神丸的再开发提供参考与借鉴。
该研究结果也表明，要确定中药复方的药效物质基础，不仅要研究体外药物的成分变化，其关键在于要明确中药复方是以何种形态入血、入血后如何变化、复方配伍对血中成分产生的影响，只有把握中药复方的内在实质，才能实现中药复方研究的科学化与现代化。至于11、12号物质的具体结构，有待进一步的研究。
注：A蟾毒灵、C华蟾毒它灵、E酯蟾毒配基、G华蟾酥毒基；大鼠灌胃标准品取血浆的体内六神丸血浆样品HPLC图：B蟾毒灵、D华蟾毒它灵、F酯蟾毒配基、H华蟾酥毒基
图3标准品与血浆混合制备的体外样品HPLC
参考文献：
[1]
李水福，黄龙森，郭文信.六神丸质量标准与质量问题[J].时珍药研究，1996，7（1）：57～58.
[2]陈琦，李小军，贾美美，等.六神丸体外抗肝癌活性研究[J].中国医院药学杂志，2014，34（19）：1627～1630.
[3]HongZ，ChanK，YeHW.SimultaneousDeterminationofBufa-dienolidesintheTraditionalChineseMedicinePreparation，Liu-Shen-Wan，byLiquidChromatography[J].PharmPharmacol，1992，44（8）：1023～1026.
[4]MaHY，KouJP，WangJR，etal.Evaluationoftheantiinflamm-atoryandanalgesicactivitiesofLiu-Shen-Wananditsindividualfract-ions[J].Ethnopharmacolo，2007，112（1）：108～114.
[5]蔡国琴，张聪，郑礼.六神丸体内抗肿瘤药效学研究[J].中成药，2012，34（6）：1163～1166.
[6]LiXJ，JiaMM，LiYS，etal.Involvementofsubstancep/neuro-kinin1receptorintheanalgesicandanticanceractivitiesofminimallytoxicfractionfromthetraditionalChinesemedicineLiu-Shen-Waninvitro[J].BiolPharmBull，2014，37（3）：431～438.
[7]曹阳，梁琼麟，章弘扬，等.中药复方六神丸中多类成分的多维液质系统筛查和鉴定[J].分析化学，2008，36（1）：39～46.
[8]吴银生.六神丸质量标准研究[J].南京中医药大学学报，2002，18（4）：232～233.
[9]张屏.不同基原蟾酥类的指纹图谱研究[D].沈阳：沈阳药科大学，2006.
[10]王喜军.中药及中药复方的血清药物化学研究[J].世界科学技术一中药现代化，2002，4（2）：1～4.
[11]方建国，彭静，王文清，等.大青叶在大鼠中的血清药物化学研究[J].中国医院药学杂志，2008，28（6）：434～436.
[12]罗琳，窦志华，丁安伟，等.大鼠灌胃复方五仁醇胶囊后血清和血浆中五味子醇甲和五味子乙素的比较[J].中草药，2007，37（10）：1486～1489.
[13]韩玲.多成分中药药代动力学研究的现状及思考[J].中国中药杂志，2008，33（21）：2442～2448.
关键词：高效液相色谱；黄曲霉毒素；芝麻酱
中图分类号：TB
文献标识码：A
文章编号：16723198（2015）22022902
黄曲霉毒素是生长在食物及饲料中的黄曲霉和寄生曲霉代谢的一组化学结构类似的产物，黄曲霉毒素主要有四种：B1、B2、G1、G2，其中B1被认为是主要的有毒物质，M1和M2是这种毒素的代谢产物。黄曲霉毒素是一种强致癌物质，能使人体的免疫功能丧失，诱导畸形、癌症的发生。许多国家已规定其相应的膳食摄入量和食品的限量标准。按照GB2761-2011《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》要求，在花生油、花生及其制品中黄曲霉毒素B1的允许最大含量水平为20μg/kg。目前市场上的芝麻酱，大都掺杂了很大比例的花生酱，由于花生容易发霉变质，将花生酱掺入芝麻酱中容易引起芝麻酱中黄曲霉毒素超标，因此开展芝麻酱中黄曲霉毒素的检测，对保障我国人民身体健康有重要意义。
目前，对黄曲霉毒素的测定方法主要有高效液相色谱法和酶联免疫吸附法。酶联免疫法操作简单，但特异性差；高效液相色谱法结合柱前衍生或普通的碘柱后衍生的方法，操作繁琐，分析时间长，并产生大量的有毒有害物质，不能满足批量检测的需求。
近年来用免疫亲和柱净化光化学柱后衍生-高效液相色谱法测定黄曲霉毒素含量已有一些报道，但芝麻酱中黄曲霉毒素含量测定方法尚未见报道。本文通过免疫亲和柱净化，光化学柱后衍生，高效液相色谱法同时测定芝麻酱中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量，取得满意结果。
1材料与方法
1.1材料与仪器
甲醇（色谱纯）购自Sigma公司；黄曲霉毒素混合标准溶液B1、B2、G1、G2购自SUPLCO公司；3mL黄曲霉毒素免疫亲和柱购自中检维康公司。
DionexUltiMate3000高效液相色谱仪，配荧光检测器和光化学柱后衍生器；DIONEXAcclaim120（4.6×250mm，5μm）色谱柱；PRIMAPM3-900TL型超声波；美国Millipore公司超纯水处理器；ScientificindustriesvortexGenie2涡旋振荡器；Agilent20管固相萃取SPE装置；奥特赛恩斯AP-9925无油真空泵。
1.2实验方法
1.2.1黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标准溶液的配制
（1）黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标准储备液的配制。
准确移取1.0mL黄曲霉毒素混合标准溶液于10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度。
（2）黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标准使用液的配制。
准确移取1.0mL黄曲霉毒素标准储备液于10mL棕色容量瓶中，用50%甲醇水定容至刻度。
1.2.2色谱条件
色谱柱：C18（4.6×250mm，5μm），柱温：30℃，流动相为甲醇：水=45∶55（V∶V）；流速：1mL/min；进样量：10μL；激发波长：360nm；发射波长420nm。
1.2.3样品提取
称取均匀试样5g（精确至0.001g）于50mL离心管中，加入1.0g氯化钠、25mL甲醇+水（V∶V，70∶30），涡旋混匀，超声提取20min，涡旋混匀，8000r/min离心10min，取上清液用折叠式槽纹滤纸过滤，收集滤液5mL，用10mL超纯水稀释，供净化用。
1.2.4样品净化
将免疫亲和柱连接于10mL注射器下，待免疫亲和柱内的液体弃去1/3后，将上述稀释后的滤液全部注入注射器中，样品溶液在重力下过柱，待样品提取液滴完后，向注射器内加入10mL水淋洗免疫亲和柱，直至2～3mL空气通过柱体，用真空泵抽干，向免疫亲和柱内准确加入1.0mL甲醇洗脱，用真空泵抽干，收集全部洗脱液，过0.45μm滤膜，供高效液相色谱用。
2结果与讨论
2.1提取条件的选择
实验中采用甲醇-水（V∶V，6∶4）、甲醇-水（V∶V，7∶3）、甲醇-水（V∶V，8∶2）为提取剂，按照上述方法处理样品，加标量按质量浓度为10μg/kg添加，每个浓度的提取液平行测定三次，比较它们的提取效果。结果表明，甲醇-水（V∶V，6∶4）提取液，由于有机溶剂所占比例较低，提取效率较低；甲醇-水（V∶V，8∶2）提取液，甲醇浓度过高，破坏免疫亲和柱的抗体，回收率较低；甲醇-水（V∶V，7∶3）的提取效果较好，可以满足全部组分对回收率的要求（见表1）。
2.2衍生方式选择
对三氟乙酸柱前衍生法、柱后碘溶液衍生和光化学在线柱后衍生法进行了考察。三氟乙酸柱前衍生法受衍生试剂用量、衍生反应温度、衍生时间、溶剂转换等因素影响，衍生结果重现性较差，回收率在75.8%～115.5%之间，且需要用到大量有毒有害试剂；柱后碘衍生法和光化学柱后衍生法均能获得较好的重现性，回收率均在86.8%～99.5%之间，但柱后碘衍生法需要配制碘溶液，仪器操作繁琐；光化学衍生法在仪器操作上相对简单，样品处理后可直接进样分析，故本实验选择光化学在线柱后衍生法。经过光化学柱后衍生的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标准溶液色谱图见图1。
2.3线性范围及检出限
配制一系列质量浓度的黄曲霉毒素混合标准工作溶液，在优化的实验条件下分别进行测定，以峰面积Y（counts）对其浓度X（μg/L）进行线性回归；在阴性样品中依次加入较低浓度的标准溶液后进行测定，以3倍基线噪声（S/N=3）所对应的浓度计算方法的检出限，结果见表2。
2.4方法回收率和精密度实验
选择一个空白芝麻酱，分别加入低、中、高三种不同浓度的黄曲霉毒素，平行测定三次，回收率和相对标准偏差见表3。
2.5实际样品的测定
按照1.2实验方法对饮食店中随机采集的50份芝麻酱样品中黄曲霉毒素的含量进行分析，其中11份样品中检出黄曲霉毒素，总量分布在1～200μg/kg之间，色谱图见图2。
3结论
本方法建立的免疫亲和柱净化光化学柱后衍生-高效液相色谱法同时测定芝麻酱中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，方法操作简单、灵敏度高、重现性好，能够对芝麻酱样品中黄曲霉毒素含量进行批量、准确、快速的检测。
参考文献
[1]中华人民共和国卫生部.GB27612011食品安全国家标准食品中真菌毒素限量[S].北京：中国标准出版社，2011.
[2]中国国家标准化管理委员会.GB/T5009.232006食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定[S].北京：中国标准出版社，2007.
[3]国家质量监督检验检疫总局.GB/T189792003食品中黄曲霉毒素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法[S].北京：中国标准出版社，2003.
[4]夏凡，杨丽君，王静等.电化学衍生高效液相色谱和荧光光度法检测花生酱中的黄曲霉毒素[J].分析实验室，2010，29（4）：119122.
[5]兰珊珊，刘宏程，梅文泉等.酶联免疫法测定不同食用植物油中黄曲霉毒素B1[J].粮食与油脂，2010，（4）：3941.
【关键词】阿托品；中毒；急救护理
文章编号：1004-7484（2013）-02-0778-01
阿托品中毒剂量为5-10mg，致死剂量为80-120mg，在对有机磷农药中毒救治过程中为了使患者尽快达到阿托品化，常使用大剂量阿托品甚至高达350mg，从而造成阿托品中毒。［1］由于受“宁可中毒，不可不足”的阿托品用量影响，在临床上发生阿托品中毒的患者并不少见，其临床主要表现为瞳孔散大、面热潮红、口唇干燥、发热、意识模糊、心动过速、烦躁不安、抽搐、幻听躁狂等，严重者可使患者呼吸瘫痪或者陷入昏迷，如果不及时进行救治将导致患者死亡。［2］为了探讨阿托品中毒的原因和急救护理方法，本文选取2011年7月至2012年9月我院收治的阿托品中毒患者10例作为研究对象进行分析，结果报告如下：
1资料与方法
1.1一般资料资料来源于2011年7月至2012年9月我院收治的阿托品中毒患者10例，男性4例，女性6例，年龄在16-65岁之间，平均年龄为（34.5±2.1）岁，中毒时间至就诊时间20min-12h不等，平均为3.7h；所有患者均为有机磷农药中毒抢救过程中造成的阿托品中毒，农药中毒量为10-200ml，其中农药口服中毒8例，非口服中毒2例，重度中毒2例，中度中毒4例，轻度中毒4例；阿托品中毒剂量10-350mg不等，平均为（88.5±2.9）mg。
1.2临床诊断标准①所有患者均符合阿托品中毒的临床诊断标准［3］；②临床表现为瞳孔散大、发热、面色潮红、口唇干燥、呼吸增块、意识模糊、烦躁不安、抽搐、幻听躁狂等。体温39℃以上者5例，心动过速（≥120次/L）、烦躁不安2例，幻听1例，昏迷1例，呼吸抑制1例。以上患者均出现瞳孔散大（直径4-6mm）。
1.3急救护理方法立即停用阿托品，采用利尿剂。对高热患者进行物理降温和药物降温；对于烦躁不安患者肌肉注射安定10mg或者巴比妥0.2g；对于昏迷患者采用地塞米松10mg、甘露醇（20%）125ml；对于呼吸抑制患者静脉注射纳诺酮0.6mg，必要时气管插管或切开气管。在进行急救后密切观察患者病情，并采取有效的护理措施。
2结果
2.1造成阿托品中毒的原因造成阿托品中毒的原因主要包括过分追求早期大剂量治疗、未详细询问患者的病史、片面强调阿托品化导致对疾病缺乏全面认识、在阿托品化后未能及时减量、不合理使用复能剂等。
2.2护理结果经过急救护理，10例患者中9例患者治愈，治愈率为90.0%，1例死亡，死亡率为10.0%。
3讨论
3.1清除毒物对于口服阿托品患者可进行洗胃、导泻等措施，排除毒物，并有效防止未吸收的阿托品吸收，常用的洗胃液包括生理盐水、碳酸氢钠等；对于中毒患者越早洗胃越好，洗胃时胃管通过口或者鼻插入，先吸净胃内的液体，然后注入胃液，每次300-400ml，注意观察患者病情及洗胃液的颜色、液量和性质，直至无色无味，可停止洗胃。［4］
3.2急救方法立即停用阿托品，采用利尿剂，另外可皮下注射新斯的明0.5-lmg，每15min一次，直至瞳孔缩小、症状缓解为止。对高热患者进行物理降温和药物降温；对于烦躁不安患者肌肉注射安定10mg或者巴比妥0.2g；［5］对于昏迷患者采用地塞米松10mg、甘露醇（20%）125ml；对于呼吸抑制患者静脉注射纳诺酮0.6mg，必要时切开气管。
3.3病情观察密切观察患者的病情和生命体征，每10min测量一次体温、血压、脉搏、呼吸等，密切观察患者瞳孔变化及意识情况，出现异常及时向医生汇报。对于呼吸无力或者呼吸停止的患者可采取气管插管，切开气管，并用呼吸机进行辅助呼吸；对于重症患者进行重症监护，密切观察病情变化，及时进行吸痰，防止痰液阻塞气管。［6］
总之，造成阿托品中毒的原因包括多个方面，在对阿托品中毒病人进行急救护理时要分析中毒原因，观察临床症状，采取有效急救护理措施。
参考文献
［1］赵先伟，张俊华，吕昌玲.急性有机磷中毒患者阿托品中毒15例临床分析［J］.中华急诊医学杂志，2011，10（4）：274-275.
［2］吴碎秋，傅声帆，练红，等.急性有机磷中毒继发阿托品中毒呼吸衰竭的护理体会［J］.现代实用医学杂志，2011，8（17）：520-521.
［3］臧莉.急性有机磷中毒阿托品、复能剂以及相关治疗的现状［J］.临床急诊杂志，2012，7（5）：258-259.
［4］邱泽武，田英平.农药中毒诊治中42例阿托品中毒致呼吸肌分析［J］.中国急救医学，2005，25（3）：183-184.
【关键词】血液透析；重度有机磷中毒；灌流；临床；对比
文章编号：1004-7484（2013）-02-0562-02
有机磷中毒的机理是：有机磷进入机体后会抑制乙酰胆碱酯酶的活性，导致机体内积累大量的乙酰胆碱，迫使胆碱能神经长时间持续兴奋最后衰竭，从而引发一系列的毒蕈碱样、烟碱样和中枢神经系统等不良症状。重度的有机磷中毒患者易并发中间综合征可能昏迷甚至呼吸衰竭而死亡。因此，加强对有机磷中毒治疗方法的研究是急诊内科医学研究人员的重要职责。在我院，治疗有机磷中毒治疗的方法是先给中毒者进行洗胃、胃内注入活性碳和甘露醇、应用阿托品及胆碱酯酶复活剂外等常规救治，此外，还会利用血液灌流合并血液透析对患者进一步进行治疗。本文结合来我院接受有机磷中毒的40位患者作为临床观察对象，探索血液透析与灌流联合治疗重度有机磷中毒的安全性及治疗效果。
1资料与方法
1.1一般资料本次研究选取了2010年4月至2012年4月来我院接受有机磷中毒的40位患者作为观察对象，其中，男性患者14位，女性患者26位，整体年龄在15-68岁之间，平均年龄45岁。患者中毒原因都是自服农药，其中18位患者服用的是敌敌畏，12位患者服用的是甲胺磷，8位患者服用的是氧化乐果，还有2位患者服用药物药名不详。38位患者服药量在20-100ml之间，有2位患者的服用量不详。选取的中毒者有20位接受了透析灌流治疗，20位没有接受透析灌流治疗，因此，分两组将治疗结果进行对比分析。
1.2治疗方法患者在来我院就诊前均没有在其它医院进行处置用药，均属于急性有机磷杀虫剂中毒（AOPP）。来医院接受检查时胆碱酯酶（CHE）活力（酶法）都在30U以下。所有的患者进院都接受了AOPP常规（洗胃、胃内注入活性碳和甘露醇、阿托品、解磷定等）治疗。有差异的是，实验组接受了血液透析治疗，血液灌流1-2次，血液透析2-4次，平均血液灌流1.5次，透析次数3次，每次血液灌流时间2小时，透析时间2-4小时不等，平均灌流时间2小时，透析时间3小时。处理完成后都回急诊科进行观察治疗。
1.3对比项目本次研究对治疗结果进行对比分析，主要是分析对比两组患者从中毒至开始抢救时间、达阿托品化时间、达阿托品化量、阿托品总量、胆碱酯酶恢复正常时间及死亡率、住院时间等相关数据的差异。
1.4统计学分析方法对本次结果采用SPSS16.0分析软件进行处理，对相关资料差异采用X2和t检验，以α=0.05为标准观察数据是否具有统计学意义。
2结果
接受透析灌流治疗患者小组的达阿托品化时间为（3.6±1.2）小时，未接受透析灌流治疗患者的达阿托品化时间（7.7±1.3）小时；透析灌流组患者的达阿托品化量为（73.5±11.5）mg，非透析灌流组患者的达阿托品化量为（186.5±77.5）mg；透析灌流组患者的胆碱酯酶恢复时间为（13.5±1.5）天、非透析灌流组患者的胆碱酯酶恢复时间为（17.5±5.5）天；透析灌流组没有出现死亡的病例，非透析灌流组的死亡率为15%。采用SPSS统计软件对上述数据的差异进行检验，检验结果有统计学意义（P
3讨论
在治疗重度急性中毒时，要立刻检查患者的呼吸、循环功能、生命指征，并采取相应的紧急治疗手段如停止毒物接触、清除体内尚未吸收的毒物、促进已吸收毒物的排出、特殊解毒药的应用、对症治疗，救治越早效果越好。促进已吸收毒物的排出多采用血液透析、血液灌流、血浆置换。进行血液透析可以达到清除中毒者血液中分子量较小、非脂溶性的毒物的目的，血液灌流是把血液流过装有活性炭或树脂的灌流柱，将毒物从血液中吸出来，再将清洁后的血液输回患者体内，这两种方法是目前进行中毒抢救的主要手段。应用血液灌流联合血液透析救治重度AOPP，不但可清除水溶性毒物，而且还可清除脂溶性及与蛋白结合的毒物，提高了单纯应用血液灌流或血液透析的清除能力，效果满意。由于单纯血液灌流没有加温装置，会造成血液温度降低，易导致血液凝固，可利用血液透析加温系统，维持血液温度，不需要附加加温装置。同时借助血液透析的超滤与弥散作用，清除体内多余的水分，纠正水电解质、酸碱平衡紊乱，减轻肺水肿及肝肾损害，维持心肺功能。结合本次临床观察的结果可以看到，采用透析灌流治疗的效果明显好于没有接受透析灌流治疗效果。总之，给重度有机磷重度患者进行透析灌流治疗后可以大幅度减少阿托品化量、缩短达阿托品时间及胆碱酯酶恢复时间、降低死亡率，治疗效果明显。
参考文献
[1]孙西照，张崇海，范志红，赵翠云.血液透析加灌流治疗急性重度有机磷中毒26例体会[J].内科急危重症杂志，2000（03）.
[2]彭月文，黄耀立.血液透析与灌流联合治疗急性重度药物中毒临床体会[J].中国危重病急救医学，2001（01）.
下一篇：当前会计电算化的现状(6篇)
热门推荐