大豆分离蛋白(收集5篇)

大豆分离蛋白篇1

蛋白质主要存在于大豆中，大豆蛋白质含量几乎是肉、蛋、鱼的二倍。而且大豆所含的蛋白质中人体“必需氨基酸”含量充足、组分齐全，属于“优质蛋白质”。

利用豆腐黄浆水生产有保健功能休闲食品

项目简介：该产品系利用废弃物深加工而成，成本低，技术性附加值高，且适于小规模生产，资金周转率高，基于我国市场上各种休闲食品虽多，但能量普遍偏高，不适于健康要求，故低能量的休闲食品市场看好，加之现国内尚无既是低能量的，又有特殊保健因子的同类产品，估计毛利率在30%以上，也可将该产品申请为保健食品，收益可更高。

大豆异黄酮提取纯化技术

项目简介：该项目以大豆胚芽为主原料，经过萃取、工业色谱纯化技术，生产高纯度大豆异黄酮。将异黄酮含量提高至40～90%（视市场需要定）。产值2.5亿元；大豆胚芽4800吨（干基）；溶剂300吨（耗损量）；吸附剂10吨；循环冷却水200吨/时；动力电200KVA；水蒸汽（0.6MPa）6吨/时；车间厂房1600平方米；设备投资800万元。

大豆及豆粕深加工技术

项目简介：该项目以大豆分离蛋白或豆粕为原料，通过有控制的酶解，生产高质量的大豆多肽。该产品可用作营养疗效食品（具有降血脂、降血压和快速补充营养功能）和运动食品的功能性配料成分。以大豆或豆粕为原料，通过微生物发酵，生产具有抑制病原菌、调节肠道微生态环境、增强免疫力及促进动物快速生长等功能的多效生物饲料添加剂产品。该品不仅天然、安全、高效、多功能，而且具有活菌含量高，耐热、耐酸碱、易保存等特性，可替代或部分替代饲料中的抗生素。

由大豆粉末磷脂提取磷脂酰胆碱方法

项目简介：该发明公开了属于化学医药产品提取技术的一种由大豆粉末磷脂提取磷脂酰胆碱的方法，是采用乙腈与低碳醇的混合溶剂对大豆粉末磷脂进行多级逆流浸提，并将各级提取液在真空中除去溶剂的工艺方法，获得含磷脂酰胆碱为70％以上的产品，一般收率达70％以上。该方法工艺简单、设备投资小、适合于工业大生产。

纳米级大豆膳食纤维

项目简介：该项目研制的纳米级大豆膳食纤维是物理改性的精制纤维素，应用纳米技术改性纤维素的超微结构，使之具有多种独特的功能，在多种食品和饮料行业中具有广泛的应用。

该产品是高溶解性的膳食纤维；高持水性；极低的粘度；耐酸、耐热和耐盐；优良的蛋白质稳定性；极佳的乳化性。该产品可用于稳定剂、品质改良剂、脂肪替代品、保健食品原料。

利用生物修饰技术制取功能性大豆蛋白

项目简介：该研究利用植物蛋白酶、动物蛋白酶对蛋白进行水解，从中寻求能够将大豆分离蛋白性能改变的最佳蛋白酶的种类和水解技术，为其改性蛋白的特性研究及产品开发奠定基础。最终开发产品植物奶粉蛋白质含量30%以上；乳品专用大豆分离蛋白含量在80%以上，NSI值在80%以上：抗氧性肽，分子量小于1000，相对抗氧化力1.0以上，注射型分离蛋白85%以上。

大豆种衣剂

项目简介：该产品是根据大豆生长发育特点而研制的种子包衣剂，内含大豆生长所必需的Zn、Mo等多种微量元素和杀虫剂．杀菌剂及成膜剂，具有增加营养，防治病虫等功效，可促进苗期大豆根系生长发育，增加大豆根瘤数量，尤其适用于重迎茬大豆。该剂为粉剂，便于运输和储藏。每包种衣剂加入200毫升热水搅拌至无结块为止，冷却后倒入15公斤种子，拌匀，然后放阴处摊开晾干，待播种。拌后的种子不可食用或喂牲畜。

全脂大豆完全脱腥蛋白粉制备方法

项目简介：该项目运用独特的工艺方法较彻底地钝化了胰蛋白酶抑制剂、脂肪氧化酶、血球凝集素和致甲状腺肿素的活性，使大豆较理想地克服了大豆所固有抗营养性、致甲状腺肿大、肠胃不适、胀气和豆腥苦涩味等五大副作用，从根本上克服了当前流行的脱腥技术所生产的蛋白粉只能做食品添加剂的弊病，在国内外首次实现了大豆完全脱腥。

大豆乳清废水处理方法

项目简介：该发明涉及一种大豆乳清废水处理方法，并且从大豆乳清废水中提取低聚糖和蛋白。大豆乳清废水是指在以低温脱脂豆粕为原料生产大豆分离蛋白过程中，豆粕经碱溶、酸沉、离心分离提取蛋白后产生的有机废水，其中含有蛋白、低聚糖等类物质，COD为1800～20000mg/L，生化处理投资大，而且浪费了资源。该技术方案运用多级膜分离方式对大豆乳清水进行处理，可提取大豆低聚糖和蛋白形成产品，增加企业经济效益，处理后的水可循环使用，无污水排放，不需建污水处理装置，节约水资源。

大豆植物油提取磷脂

项目简介：该产品涉及一种运用膜分离技术改造大豆植物油提取工艺，提取高品质大豆磷脂的方法，适用于大豆植物油加工行业。该技术方案提取的磷脂为高品质大豆粉末磷脂和大豆溶血磷脂，其应用价值大大高于传统方法生产的大豆浓缩磷脂。该方法提供的油脂精炼工艺比传统工艺路线减少了碱炼脱酸工序，避免了大量碱炼废水的产生，既降低了炼油成本，又消除了炼油废水的一个重要污染源。该方法提炼的大豆成品油，因其中的磷脂已基本提取，可明显提高成品油的品质和保质期。

提取大豆分离蛋白的方法

项目简介：该产品涉及一种提取大豆分离蛋白的方法，特别涉及一种运用无机陶瓷膜技术提取大豆分离蛋白的新方法。大豆蛋白质具有良好的营养功能，能够补充人体必需的能量，增强人体免疫力，对防治心脏病、糖尿病、癌症等疾病具有一定的效果，大豆分离蛋白的蛋白质含量不低于90%，是纯度最高的大豆蛋白制品。该技术方案取消了传统工艺中的酸沉工序，提高了产品质量，减少盐酸使用量，降低了生产成本，提高了蛋白的收率，可达到95%以上。由于取消酸沉工序，改善了大豆乳清水的处理条件，便于提取其中的低聚糖等产品。

大豆功能因子连续提取工艺

项目简介：传统工艺生产浓缩蛋白产品单一、生产成本高；功能因子不能分开，影响产品质量；污水排放量大。该工艺使用低级醇类用于萃取非蛋白成份；用膜技术浓缩低聚糖；等电点分离大豆核酸；反渗透浓缩治理废水；双溶剂分离大豆低聚糖、异黄酮；喷雾干燥。一条生产线上连续提取浓缩蛋白、大豆低聚糖、异黄酮、皂甙、核酸等功能因子；异黄酮纯度＞80%，皂甙纯度＞80%，低聚糖纯度＞40%，核酸纯度＞30%，蛋白含量＞70%；污水零排放。

高效因氛大豆基因工程根瘤菌HN32的构建和应用

项目简介：本成果以慢生型大豆极瘤菌22-10为受体，采用构建供体首基因文库－三亲本杂交－植物筛选的技术路线，将来自快生型大豆极瘤菌B52的3.7kB增效基因导入22-10，并通过盆栽试验从获得的转移接合子中筛选出增效菌株HN32。该菌株在小区试验中较受体菌增产7.8%，比不接种对照增产16.8%。在扩大的31个小区试验中平均比受体亩增产7%。经在黑龙江、广西和四川等地进行的大面积推广应用试验，结果表明HN32具有明显的增产效果和应用前景。

从大豆豆粕／胚芽／乳清废液中提取活性天然产物工艺

项目简介：该项目在充分与民间资本和设备合作的基础上，成功的开发出了大豆天然活性产品联产工艺。用该工艺生产的天然活性产品，成本低，质量明显高于目前市售产品。而且在此基础上，可进一步生产市场亟须的高端精细产品(大豆异黄酮甙元和染料木素单体)。项目工艺通过对豆粕或胚芽或乳清液的提取制备大豆异黄酮，之后利用生产异黄酮的下脚料生产大豆皂甙和低聚糖。大豆异黄酮甙元为通过水解大豆异黄酮而获得。染料木素是通过分离从甙元混合物中制备。

混合型大豆干酪加工关键技术研究

项目简介：该项目筛选了适用于混合乳的发酵剂菌株，确定了牛乳和豆浆的配合比例及凝结混合乳的特定酶，研究了混合型干酪成熟过程中发生的变化。项目确定了混合乳中豆浆的最佳添加量。将豆浆的添加量控制在0、10%、15%、20%、25%、30%，按照契达干酪的制作方法加工混合型干酪，并测定干酪的营养成分、产率及感观指标。观察了菌株发酵混合乳的凝乳性能，检测了菌株发酵不同基质凝乳的酸度、粘度、双乙酰、胞外多糖和pH4.6可溶性氮含量，结果表明，发酵基质不同时，菌株的发酵特性也不同。确定了适于凝结混合乳的凝乳酶的种类和添加量。探讨了混合型干酪在成熟期间的质构特性和蛋白质含量变化。

大豆新品种长农22号

项目简介：该品种籽粒圆形，种皮浅黄色、微光、脐浅黄色、百粒重18～20克，褐斑虫食率低，外观品质优良。籽粒脂肪含量19.25%，蛋白含量39.11%。属中晚熟品种。预计推广10万公顷以上，每公顷平均2998公斤，比吉林30增产9.0%，每公斤大豆2.5元计算：该品种推广后，将比老品种大豆增产2580万公斤，农民增加收入0.65亿元人民币。

大豆功能因子研究

项目简介：该项目以高温(或低温)豆粕为原料，在一条生产线上，连续提取大豆皂甙、异黄酮、核酸、低聚糖、浓缩蛋白的生产新技术中试鉴定。在一条生产线上连续提取大豆皂甙、异黄酮、核酸、低聚糖、浓缩蛋白5种产品。效益大幅度提高，连续提取不仅使产品得率提高，而且使纯度提高。项目采用“逆向分离技术”，将高温豆粕中的蛋白质全部分离提取(蛋白质利用率＞98%)，在国内、外，首次以豆粕为原料，提取出大豆核酸，并达到工业生产规模。

分子蒸馏法从大豆油脱臭馏出物中提取天然维生素

项目简介：该项目使用分子蒸馏法从大豆油脱臭馏出物中提取天然维生素。分子蒸馏是一种在高真空度条件下进行的高科技分离技术。由于在分子蒸馏过程中操作系统压力可达0.1Pa，混合物可以在远低于常压沸点的温度下分离，另外组分受热时间短，因此，该技术已成为分离目的产物最温和的分离方法，特别适合于分离低挥发度、高沸点、热敏性和具有生物活性的天然产物。工艺流程为大豆油脱臭馏出物脱除游离脂肪酸甲酯化中和分离甾醇脱除脂肪酸甲酯（生物柴油）浓缩的天然VE。从大豆油脱臭馏出物中提取天然维生素，不但可以大大提高经济效益，为市场提供急需的产品，还可出口国际市场。

药用辅料大豆磷脂

项目简介：该项目在CO_2超临界条件下液化溶解油脂，把蛋黄油和胆固醇分离出来。利用高速磁力剪切器配合乙醇溶剂，提取出大豆磷脂－其工艺水平国内首创，该技术正在申请发明专利。该工艺采用高速磁力剪切器打开了磷脂分子的间隙，加速了溶剂的渗透力，使粉碎和萃取同步进行，有效地缩短时间，降低能耗，提高产品提取率，与传统工艺相比，生产时间缩短了50倍。相比其他方法有效地降低有机溶剂乙醇的用量，降低了安全隐患。根据层析剂对粗磷脂的吸附性不同，进一步把PE、PI、PS等杂质分离，得到最终产品大豆磷脂，并且萃取率由传统的仅为3%提高到15%。

乳酸菌大豆植物蛋白饮料项目

项目简介：该产品是生物技术与大豆加工技术、发酵技术及饮料加工技术结合起来的一个综合产品，是微生物专家和食品制造专家多年潜心研究的结晶。通过多种组方、筛选、评价、研制、试产，在解决一系列技术难题后，该项目现已完全成熟，成功开发了益生菌功能性新饮料――乳酸菌大豆植物蛋白饮料系列产品。该饮料以大豆豆浆为原料，经过特殊高活力乳酸菌生物发酵技术和特殊的科学工艺流程研制而成，产品结构型式分活性和非活性两种：活性乳酸菌有搅拌型、凝固型及多种果味饮料型；非活性乳酸菌有清爽透明型和多种果味型。

大豆啤酒生产技术

项目简介：该项目产品大豆啤酒是用大豆酿制的以营养保健为特色的高档啤酒。产品以优质无污染豆粕、酒花和部分麦芽为主要原料，采用高新生物技术和独特工艺经发酵酿制而成。具有预防肥胖、不胀头、营养价值高等特点，自成系列，适合不同消费阶层的需要。大豆啤酒是啤酒史上的一项新发明，有广阔的发展前景。该项技术是将豆粕中的淀粉和蛋白质通过微生物发酵法分解而成的大豆啤酒的糖源和氮源，再按常规生产、制成有营养价值和保健功能的新型啤酒。

利用酱油渣生产大豆肽白酒技术

项目简介：该项目是以酱油渣生产大豆肽白酒项目。它除具有普通白酒的特点之外，还具有大豆肽的保健功能，口味柔和、酱香浓郁，该技术已获得国家专利。其加工过程，成功的运用了生物工程技术中的酶技术、发酵技术，解决了大豆富含大量蛋白质和脂肪的难题。其酒中含有普通白酒所不具备的短肽、多肽、低肽。脂肪分解为对人体有益的各种有机酸和酯，使其不仅含有硒、磷、钙、锌、铁、镁、钾、VA、VB、和异黄酮等多种微量元素、维生素等，而且增加了保健功能。大豆肽白酒酒度为38°～58°，口感香醇。其卫生和理化指标均达国家优级酒标准。

生长因子在大豆异黄酮预防骨质疏松中作用

项目简介：该研究用体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞，用SP免疫组化方法测定成骨细胞中TGF-β1和TGF-βR1、TGF-βR2、IGF-1的表达情况。研究发现大豆异黄酮可显著地促进成骨细胞的增殖和分化，并促使成骨细胞形成矿化结节。大豆异黄酮可预防去卵巢大鼠骨钙、锌、铜丢失，预防骨质疏松。该课题深入研究大豆异黄酮预防绝经后骨质疏松的机理，尤其从细胞水平、分子水平研究三种骨生长因子在大豆异黄酮预防绝经后骨质疏松中的作用，对探讨大豆异黄酮预防绝经后骨质疏松的机理、指导合理膳食和预防绝经后妇女骨质疏松有重要的理论意义和社会效应。

高效固氮大豆基因工程根瘤菌HN32的构建和应用

项目简介：该成果以慢生型大豆根瘤菌22-10为受体，采用构建供体菌基因文库三亲本杂交植物筛选的技术路线，将来自快生型大豆根瘤菌B52的3.7kb增效基因导入22-10并通过盆栽试验从获得的转移接合子中筛选出增效菌株HN_32。该菌株在小区试验中较受体菌增产7.8%，比不接种对照增产16.8%。在扩大的31个小区试验中平均比受体菌增产7%。经在黑龙江、广西和四川等地进行的大面积推广应用试验结果表明HN_32具有明显的增产效果和应用前景。该成果已进入中试。在取得农业部基因工程安全委员会商品化的批准后，该成果在大豆主产区和新发展区有广阔的应用前景。

大豆杂种有时利用与优质超高产品种培育

项目简介：该项技术是利用吉林省农科院自主开发的大豆“三系”，即细胞质雄性不育系、保持系和恢复系，选育大豆杂交种，并利用切叶蜂传粉技术开发出“昆虫-环境植物三位一体综合调控”的高效、低成本制种技术，实现杂交大豆产业化。该研究获得中国和美国发明专利。传粉昆虫切叶蜂的繁殖是苜蓿制种田中进行的，在繁蜂的同时大大提高了苜蓿种子的产量，噶技术不仅降低了杂交种成本，也促进了我国苜蓿种业的发展。该项目成果包括大豆杂交种；育种及制种技术体系；切叶蜂繁殖及放蜂技术。其应用范围包括农业领域、苜蓿种业。

大豆优质高效抗逆关键技术研究

项目简介：该项目进行了生物/非生物逆境（干旱、水分和养分亏缺、病虫害等）影响大豆的机制和引起大豆产量和品质降低的原因研究；改变生境、提高作物抗逆信与水分和养分利用效率的栽培调控技术研究；调节内源激素、提高作物抗逆性与水分和养分利用效率的调节剂调控技术研究；优质、高效、低风险大豆调控栽培工程技术体系研究。其初步明确了干旱、水分和养分亏缺、病虫害等对大豆的影响机制和引起大豆产量和品质降低的原因；筛选出低污染除草剂、提出机械与低污染除草剂相结合的除草剂技术；提出了大豆病虫草害生物防治技术；初步建立了大豆质量保优控制体系。

大豆蛋白环保型胶粘剂生产技术

项目简介：该技术以大豆油脂生产的副产品脱脂豆粕为原料，利用高压高温碱解环流技术结合化学改性技术，及与其它高分子的共聚、共混改性技术，研制出环保型涂布印刷纸涂料胶粘剂和绿色复合板材粘接剂。该产品是环境友好产品。其中，板材粘接剂无甲醛等VOC释放，粉状，可直接加水调配，20%浓度时的粘度≤5000cp；阻水性相当于脲－甲醛树脂；防水性优于酚醛树脂；添加甲叉二异氰酸酯；粘合强度≥50to64kg/cm^3。涂布印刷纸涂料胶粘剂可完全替代酪蛋白，粉状，强分散性，可直接加冷水调配，高含固量和流动性，50%浓度时的粘度≤300mPas，强快干性，70%浓度时涂层固体粘度≥20,000mPas，直接和色素结合，吸附率超过50%，中度的水分滞留，平均涂层厚度≤5μ。

风味良好的大豆多肽生产方法

项目简介：酶促水解大豆蛋白生产大豆多肽是大豆深加工的一个重要方向，因为大豆多肽具有容易消化吸收，增强体力，降低血压、血脂，减肥，提高免疫力等功能，可以作为多种人群的保健食品。该项目采用固态发酵技术自行制备蛋白酶制剂，该蛋白酶与一般的商品蛋白酶相比，具有成本低廉，水解能力强，水解产物无苦味等特点，中试结果表明可工业化生产。以低温脱溶豆粕为原料，经碱溶酸沉以及酶解工艺，可获得DH高达42%的大豆肽，精制后可用于肠胃病人的疗效食品、运动员饮料的配制，目前医院采用的从美国进口的大豆多肽价格高达100多元/100克，日本的大豆多肽运动员饮料年销售额已高达30亿日元仍有上升趋势。此外这种多肽的粗制品具有适口性好、成本低廉的特点，可作为酸解蛋白的替代品用于酱油工业，也可用于饲料工业。

大豆蛋白可降解塑料生产技术

项目简介：该技术利用低温脱脂大豆粕为原料，生产大豆蛋白生物可降解塑料。

该技术主要通过加入改性剂、增塑剂、交联剂、填充剂、还原剂、剂、防腐剂、着色剂和其它助剂，使大豆蛋白塑料的机械特性和耐水性得到改善。主要性能指标方面，拉伸强度可达到4028g，伸长率达到57%，拉伸强度7.8MPa，冲击强度383MPa，断裂伸长率53.2%。成本、性能及可降解性方面的比较方面，以低温豆粕（蛋白质含量为55%）为原料，原料价格为2300元/吨，与淀粉塑料相比具有原料成本可比性。用低温脱脂豆粕制造的大豆蛋白塑料粒料成本将低于5000元/吨。在性能方面，大豆蛋白生物可降解塑料具有良好的机械特性，耐水性和贮藏稳定性。用模压方法制的大豆蛋白塑料在土壤中19天后60%被降解。

大豆分离蛋白篇2

(1）材料与加工设备

①原材料、辅材料及配方大豆100千克，鸡蛋40千克，葡萄糖酸内酯0.3千克，消泡剂0.2千克，聚乙烯塑料袋、盒等。

②加工设备磅秤、不锈钢容器、榨汁机、分离筛、搅拌器、板式热交换器、打蛋器、真空灌装机、蒸煮槽、冷却槽等。

(2）技术要点

①筛选为了提高加工质量，必须对原料进行筛选,以清除杂物和砂、石等。一般可以采用机械筛选机、电磁筛选机、风力除尘器、比重去石机等进行筛选，应选择颗粒整齐、无虫眼、无霉变的新大豆作原料。

②称量原料大豆的称量采用水位计量法或称重计量法。

③浸泡大豆浸泡要掌握好水量、水温和浸泡时间。通常大豆吸水量为大豆量的1.1倍左右，泡豆水要按1千克大豆添加2~2.5千克冷水的比例添加。泡豆水的温度一般控制在17~25摄氏度，水温过高就要及时换水。泡豆水的pH值要求在6.5以上，若酸度过高，也应及时换水。泡豆时间要根据季节和室温灵活掌握，春秋季节12~14小时，夏季需6~8小时，冬季需14~16小时。通常应选用不小于3立方米的泡豆容器。泡好的大豆表面光亮，没有皱皮，有弹性，豆皮也不易脱掉，豆瓣呈乳白色，稍有凹心，容易掐断。

④水洗浸泡好的大豆要进行水洗，以除去脱离的豆皮和酸性的泡豆水，提高产品质量。

⑤磨浆将泡好的大豆采用石磨或砂轮磨磨浆，为了使大豆充分释放蛋白质，应磨2遍。磨第1遍时，边投料边加水，磨成较稠的糊状物。磨浆时的加水量一般是大豆质量的2倍，不宜过多或过少。大豆磨浆以后不宜停留，要迅速加人适量的50摄氏度热水稀释，控制蛋白质的分解和杂菌的繁殖，而且可使蛋白质溶解在水里，有利于提取。加热水的同时，还要加人一定量的消泡剂，方法是取约占大豆质量0.3％-~0.5％的植物油放人容器中，加人50~60摄氏度的热水10千克，搅拌后倒人豆浆中，即可消除豆浆中的泡沫。

⑥分离磨浆后，进行浆、渣分离。为了充分提取其中的蛋白质，一般要进行3次分离。第1次分离用80-~100目分离筛，第2次、第3次分离用60~80目分离筛。每次分离后都要加人50摄氏度左右的热水冲洗豆渣，使豆浆从豆渣中充分溶解出来，进行下一次分离。最终豆渣中的蛋白质含量不超过2.5％。

⑦添加鸡蛋挑选新鲜的鸡蛋，去壳、搅匀，按配方比例加入豆浆中，混合均匀。

⑧煮浆添加鸡蛋后要迅速煮沸，使豆浆的豆腥味和微苦味消失，增加豆香味，为点浆创造必要的前提条件。将过滤好的豆浆倒入锅里，盖好盖，烧开后再煮2~3分钟。注意火不要烧得太猛，且要一边加热一边用勺子扬浆，防止糊锅。若采用板式热交换器，则加热速度快，产品质量好。加热温度要求为95-~98摄氏度，保持2~4分钟。豆浆经过加热以后，要冷却到30摄氏度以下。

⑨点浆葡萄糖酸内酯在添加前要先加1.5倍的温水溶解，然后将其迅速加入降温至30摄氏度的豆浆中，并混匀。葡萄糖酸内酯要随用随配，日常保管应注意防潮，否则将会失效。

⑩灌装采用灌装机将混合好的豆浆混合物灌入成品袋（盒）中，并进行真空封装。

⑾加温灌装好的豆浆采用水浴或蒸汽加热，温度为90~95摄氏度，保持15~20分钟。

大豆分离蛋白篇3

关键词：大豆茎叶；蛋白质含量；考马斯亮蓝染色法

中图分类号：TS63文献标识码：A文章编号：0439-8114（2012）20-4610-03

蛋白质是一项质量和资源评价的重要指标[1]，用一种快速、准确、方便的方法来检测蛋白质含量是必不可少的。近年来，许多学者用考马斯亮蓝染色法和其他方法对蛋白质含量进行了测定[2-9]。蛋白质中的酰胺基团与考马斯亮蓝染料中的阴离子结合使溶液显蓝色，测定效果可通过测定显色稳定性等多个性状指标进行全面客观地评价。本试验采用盆栽大豆，对大豆的茎叶蛋白质含量与大豆产量进行考察，通过分析它们之间的影响与关系，为今后大豆育种工作提供试验方法。

1材料与方法

1.1材料

供试样品为大豆茎叶（实验室自制）。

牛血清白蛋白（进口分装），购于上海亿欣生物科技有限公司；考马斯亮蓝G-250（进口分装），购于中国医药（集团）上海化学试剂公司；其他试剂均为国产分析纯试剂。

1.2仪器

SHB-IIIS循环水式多用真空泵和抽滤装置（郑州长城科工贸有限公司）、EL303型电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]；Cary50紫外分光光度计（美国瓦里安有限公司）。

1.3方法

1.3.1蛋白质标准溶液的配制准确称取牛血清白蛋白100.0mg，用去离子水定容至100mL，即为

1mg/mL蛋白质标准液，4℃保存待用。

1.3.2考马斯亮蓝G-250溶液的制备称取考马斯亮蓝G-250100.0mg于研钵中，取体积分数为95%的乙醇（下同）50mL，从中取约10mL加入研钵，将考马斯亮蓝G-250研成粉并溶解；轻轻将上层液体转入500mL烧杯中，再取10mL乙醇溶液于研钵中研磨，同法收集，重复洗涤3次。最后用20mL乙醇分次洗涤研钵，合并液体于烧杯中。取体积分数为85%浓磷酸100mL分次加入烧杯再转入

1L容量瓶，定容，抽滤，得考马斯亮蓝G-250溶液。

1.3.3标准曲线的绘制分别吸取0.2～1.0mL标准蛋白质溶液于10mL试管中，各管补加0.15mol/LNaCl溶液至1mL，各取0.1mL于新试管中并加入5mL考马斯亮蓝G-250溶液，摇匀，放置2min，于595nm处测定其吸光度[7]。

1.3.4样品中蛋白质含量的测定取样品溶液0.1mL，按上述方法测定其吸光度，再根据标准曲线方程计算出样品的蛋白质含量[8]。

2结果

2.1标准曲线回归方程的建立

用紫外分光光度计，以0.15mol/L的NaCl溶液作空白对照，在595nm处测定对照品溶液吸光度。以吸光度为纵坐标，蛋白浓度为横坐标，绘制标准曲线见图1。

通过测定不同浓度牛血清白蛋白的吸光度得其线性回归方程式：Y=0.4783X+0.0703，R2=0.9993。

2.2样品蛋白质含量测定结果

按蛋白质含量测定方法，同时做3个重复，大豆茎的吸光度为0.4342、0.4402和0.4375a.u.，大豆叶的吸光度为0.6114、0.6110和0.6121a.u.。计算大豆茎的蛋白质含量为7.608%、7.734%和7.677%，平均含量为7.673%；大豆叶的蛋白质含量为11.313%、11.305%和11.328%，平均含量为11.315%。

2.3稳定性试验

量取同一样品溶液1mL，每隔10min测定1次，观测其稳定性，结果见表1，表明在显色1h内吸光度稳定，RSD分别为0.04%和0.39%。

2.4重复性试验

按上述方法，分别测定大豆茎和叶蛋白提取液的吸光度，检验该方法的重现性，结果见表2，RSD分别为0.83%和1.27%，小于5%，表明重现性较好。

2.5精密度试验

准确吸取牛血清白蛋白溶液（1mg/mL）0.5mL进行精密度试验，连续测定其吸光度6次，其RSD为0.25%，小于5%，表明精密度较好，结果见表3。

2.6回收率测定

取已配制好的1mg/mL牛血清白蛋白溶液0.1mL，加入1mL大豆茎（或叶）样品溶液，然后再加入5mL考马斯亮蓝染色液，摇匀，静置2min左右，于595nm处测定其吸光度，以不加牛血清白蛋白溶液作为空白对照，根据标准曲线算出相应浓度，然后计算加入样品蛋白的量，并计算回收率[9]，结果见表4。结果表明，该方法准确度较高，可满足大豆茎叶中蛋白含量的快速定量分析。

3讨论

蛋白质分子均具有酰胺基团，棕红色的考马斯亮蓝G-250染料上的阴离子与蛋白质的酰胺基团结合，使溶液变为蓝色，由于溶液在595nm处吸光度与蛋白质含量成正比，因此595nm处测定吸光度，可计算出样品中蛋白质含量[6]。上述结果表明，考马斯亮蓝与蛋白质中的酰胺基团结合生成的蓝色非常稳定，在1h之内吸光度值变化很小，重复性较好，精密度较高，同时该方法测定蛋白含量的回收率符合大豆茎叶蛋白质含量的测定要求。大豆茎蛋白质提取液中蛋白质含量在0.7～1.0mg/mL范围内；大豆叶蛋白质提取液中蛋白质含量在1.1～2.0mg/mL范围内，用考马斯亮蓝染色法测定大豆茎叶蛋白质的含量优于其他传统方法[10，11]。但另一方面，该法线性范围窄，低浓度样品易受影响，因此，在测定时所用试管须经酸浸泡，洗净后应经高温烘干。当样品浓度大于一定浓度时，须稀释测定，另外，可用乙醇和去离子水清洗比色皿上粘染的色素[12]。综上所述，该法准确率较高且简便灵敏，对设备要求低，受干扰小，适宜于测定大豆茎叶的蛋白质含量。

参考文献：

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大豆分离蛋白篇4

关键词：大豆蛋白质；酶解；前处理；水解度

中图分类号：Q51文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)03-0027-03

StudyonPretreatmentofSoybeanProteolysis

HUChun-lin,PANYue-ping

(CollegeofFoodEngineering,HarbinUniversityofCommerce,Harbin150076,China)

Abstract：ObjectiveTostudythemethodofraiseddegreeofhydrolysisofsoybeanprotein.MethodsThroughcomparingtheinfluencesofheating,ultrasonictreatment,acidtreatmentoralkalitreatmentontheisolatedsoybeanprotein,thefeasibilityonthepretreatmentofsoybeanproteinwasdiscussed.ResultsWiththeprocessingofheating,ultrasonictreatment,acidtreatmentoralkalitreatment,thedegreeofhydrolysisofsoybeanproteinraised,especiallythroughheatingandultrasonictreatment,itobviouslyincreasedby7%～8%comparedwiththosewithoutpretreatment.ConclusionThepretreatmentmethodsofsoybeanproteolysisarereasonableandfeasible.

Keywords：soybeanprotein;enzymolysis;pretreatment;degreeofhydrolysis

为了促进大豆蛋白质的酶解反应，提高大豆蛋白质水解度（degreeofhydrolysis），常用能促进酶解的方法，如对大豆蛋白质进行前处理[1]，在酶解反应时用超声波促进酶反应[2]等。

大豆蛋白质分子内部结构复杂，多肽链紧密折叠在一起，其二级结构中有25%的α-螺旋，25%的反平行β-折叠结构，42%的β转角以及8%的自由卷曲，疏水氨基酸在其内部形成疏水区域，外面被亲水外壳包裹，这些亚基间又彼此结合形成复杂的四级结构。大豆蛋白质分子高度压缩，结构紧密，对蛋白酶的酶解作用具有很强的抵抗力[3,4]。因此，要加快酶解速度，提高大豆蛋白质水解度，就须对大豆蛋白质进行前处理，使其高度压缩的结构松散开，暴露出分子内部的酶作用位点以利蛋白酶的结合[5]。本研究分别探讨了加热、超声波、酸、碱处理对大豆蛋白质酶解的影响。

1材料与方法

1.1材料

大豆蛋白粉（食品级，哈高科大豆食品有限公司）；中性蛋白酶（酶活性50000U/g・pro，食品级，北京奥博星生物技术责任有限公司）；磷酸氢二钠、磷酸二氢钠（分析纯，天津天新精细化工开发中心）。

DF-1型集热式磁力搅拌器（金坛新一佳仪器厂）；PHB-4便携式pH计（上海伟业仪器厂）；HH-4数显恒温水浴锅（金坛荣华仪器制造有限公司）。

1.2方法

1.2.1蛋白质含量测定方法采用凯氏定氮法[6]。

1.2.2酶解方法及条件称取大豆蛋白质粉5g，以pH7.0磷酸缓冲液作溶剂，配成100mL溶液。经前处理后冷却至室温，加入蛋白酶0.5g，水浴保温，振荡酶解。反应2h后，90℃水浴酶解液保温10min灭酶，冷却至室温后测水解度[7]。

1.2.3水解度的测定方法甲醛滴定法[8]

1.2.4几种前处理方法

1.2.4.1加热其他条件不变，改变温度和热处理时间2个参数，酶解后测大豆蛋白质水解度。

1.2.4.2超声波其他条件不变，改变超声功率、超声处理时间和温度3个参数，酶解后测大豆蛋白质水解度。

1.2.4.3酸其他条件不变，改变酸浓度、酸处理时间2个参数，酶解后测大豆蛋白质水解度。

1.2.4.4碱其他条件不变，改变碱浓度、处理时间2个参数，酶解后测大豆蛋白质水解度。

2结果与讨论

2.1不经预处理的酶解反应结果

不经预处理平行做3份酶解液，水解度分别为13.50%，13.89%，13.70%，结果平均水解度为13.69%。

2.2加热处理对大豆蛋白质水解的影响

2.2.1热处理温度在加热时间（10min）不变，用不同温度（70，80，85，90，95，100℃）对大豆蛋白质预处理，然后水解，结果见图1。由图1可见，经热处理后，水解度普遍升高，在85℃时水解度最高，比不经前处理高7%，因此，热处理温度以85℃为宜。85℃之后随着温度升高水解度下降，可能是温度过高导致蛋白质的过度变性。

图1热处理温度对大豆蛋白质水解度的影响

2.2.2热处理时间在85℃的条件下，用不同加热时间（5，10，15，20，25，30min）对大豆蛋白质预处理，然后水解，结果见图2。由图2可见，水解度随加热时间缓慢升高，在15min时水解度最高，然后开始下降。因此，加热时间以15min为宜。

图2热处理时间对大豆蛋白质水解的影响

2.3超声波预处理对大豆蛋白质水解的影响

2.3.1超声功率在温度为25℃（室温），超声时间为10min的条件下，改变超声功率（40，50，60，70，80，90，100W），对大豆蛋白质预处理，然后水解，结果见图3。由图3可见，功率在50W时水解度最大，此后随着功率增大水解度逐渐下降，表明功率过大会导致蛋白质的过度变性，反而不利于酶解。

图3超声功率对大豆蛋白质水解度的影响

2.3.2超声处理时间在25℃（室温），超声功率为50W的条件下，改变超声时间（3，5，10，15，20，25，30min），结果见图4。由图4可见，随着时间的延长水解度下降，表明超声时间不宜太长，以5min为宜。

图4超声处理时间对大豆蛋白质水解的影响

2.3.3超声温度在超声功率为50W，超声时间为5min的条件下，改变超声温度（20，30，40，50，60，70，80℃），对大豆蛋白质预处理后水解，结果见图5。由图5可见，在70℃时水解度明显提高，温度再提高时水解度开始下降。这与大豆蛋白质热处理有关，超声时有温度处理，其结果相当于超声和热处理两者的协同作用使大豆蛋白质适当变性，从而有利于蛋白酶的酶解作用。

图5不同温度下超声对大豆蛋白质水解的影响

2.4酸预处理对大豆蛋白质水解的影响

2.4.1酸浓度在酸处理10min的条件下，改变酸浓度（0.05，0.1，0.5，1.0，2.0mol/L），对大豆蛋白质预处理后水解，结果见图6。由图6可见，酸处理时浓度在0.1mol/L条件下水解度最大，浓度继续增大可导致蛋白质过度变性，使水解度下降。

图6酸浓度对大豆蛋白质水解的影响

2.4.2酸处理时间酸浓度（0.1mol/L）不变，改变酸处理时间（5，10，15，20，25，30min），对大豆蛋白质预处理后水解，结果见图7。由图7可见，酸处理15min时水解度最大，此后开始下降。

图7酸处理时间对大豆蛋白质水解的影响

2.5碱处理的影响

2.5.1碱浓度在碱处理10min的条件下，改变碱浓度（0.05，0.1，0.5，1.0，2.0mol/L），对大豆蛋白质预处理后水解，结果见图8。由图8可见，碱浓度在0.1mol/L时水解度最大，浓度继续增大时可导致蛋白质过度变性，使水解度下降。

图8碱浓度对大豆蛋白质水解的影响

2.5.2碱处理时间碱浓度0.1mol/L时，改变碱处理时间（5，10，15，20，25，30min），对大豆蛋白质预处理后水解，结果见图9。由图9可见，碱处理时间对大豆蛋白质水解的影响不很明显，碱处理15min时水解度最大，此后开始下降。

图9碱处理时间对大豆蛋白质水解的影响

3结论

综上所述，大豆分离蛋白质经加热、超声波、酸、碱等处理，其水解度都有所增加，相比较而言，加热和超声波处理效果比较明显，比不经前处理的酶解水解度提高7%～8%。

大豆蛋白质在酶解前经过适当的变性，使其组成蛋白质的氨基酸肽链适当松散，有利于蛋白酶的酶解，提高水解度。

参考文献

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[6]GB/T5009.5-2003.食品中蛋白质的测定[S].

大豆分离蛋白篇5

点豆腐就是设法使蛋白质发生凝聚而与水分离。盐卤是结晶氯化镁的水溶液，属电解质溶液，可以中和胶体微粒表面吸附的离子的电荷，使蛋白质分子凝聚起来得到豆腐。卤水豆腐就是用盐卤点制的豆腐，石膏豆腐就是用硫酸钙点制的豆腐。豆浆中含有大量蛋白质，并已经在溶液内形成胶体。加入少量电解质可以发生聚沉作用，所以有南石膏，北卤水点豆腐之说。南豆腐主要采用石膏，成分是硫酸钙。北豆腐是用盐卤作为凝固剂，盐卤主要成分是氯化镁。基本原理就是静电作用，豆浆加热后表面带负电荷，二价盐离子能诱导蛋白聚集形成凝胶。石膏本身无毒，但是在于服用了多少。如同所有添加剂一样，需要看使用剂量。

（来源：文章屋网http://www.wzu.com）